第七章抗原抗体反应..ppt

3、方法 （1）直接法（可检测抗原或抗体）： 酶标板吸附抗原或抗体 洗涤 Ag－Ab酶 或 Ab－Ag酶 显色反应 Ab酶或 Ag酶 底物 酶联免疫吸附试验——直接法 * * 第五节 常见免疫分析方法 凝集反应、沉淀反应 、中和反应、补体参与的反应等。 一、抗原抗体反应类型 一）凝集反应 ： 1、定义： 颗粒性抗原与相应抗体相遇后，在电解质参与下出现肉眼 可见凝集物的现象。 2、参与要素： ① 凝聚原：参与凝聚反应的抗原，如：血细胞、菌体等。 ② 凝聚素：参与凝聚反应的抗体。 3、类型 ①直接凝集反应（定性实验，检测抗原或抗体）： 颗粒性抗原与相应抗体在有电解质时，直接结合所出现 的凝集现象。 常用方法： A、玻片法：细菌及ABO血型鉴定（标准血清检测抗原） B、试管法：肥达氏反应（伤寒或副伤寒杆菌标准液检测血清 ） ② 间接凝集反应（检测可溶性抗原或抗体）： 将可溶性抗原吸附于与免疫无关的小颗粒（载体）表面 后，与相应的抗体在电解质存在的下而发生的凝集反应。 常用载体颗粒： 红细胞 [人（ O 型）和动物（绵羊、兔鸡等）]、胶体颗粒、 聚苯乙烯乳酸、活性碳等 间接血细胞凝集试验：以红细胞作为载体的凝集反应。 ③ 凝集抑制实验 将可溶性抗原与相应抗体预先作用，然后再加入致敏颗粒（吸附相同可溶性抗原的乳胶颗粒）, 由于抗体已被可溶性抗原结合, 因而致敏颗粒不发生凝集现象。如免疫妊娠实验测验尿中HCG（乳胶凝集抑制试验，无凝集者为阳性）。 + ? 不含待测抗原，产生凝集，但为阴性反应 + ? + 含有待测抗原，不凝集，阳性反应 Patient’s sample 二）沉淀反应： 1、定义： 可溶性抗原与相应抗体在一定条件下，出现细微沉淀物的 现象。 2、参与因素： ① 沉淀原：参与沉淀反应的抗原。 包括：蛋白质、多糖和类脂溶液、血清、细菌抽提液、 组织浸出液等。 ② 沉淀素：参与沉淀反应的抗体。 3、类型： ① 环状沉淀反应： 将已知抗原（抗体）注入特制小试管中，再沿管壁徐徐加入 适量抗体（抗原），在两液界面出现白色的沉淀圆环的现象。 ② 絮状沉淀反应： 将已知抗原与抗体在试管内混匀后，出现肉眼可见的絮 状沉淀的现象。 ③ 凝胶扩散试验： 利用可溶性抗原、抗体在半固体琼脂内扩散，在其扩散 的某一部分出现白色沉淀线的现象。 凝胶扩散实验分为： 单向琼脂扩散（定性、定量分析） 双向琼脂扩散（定性分析） 三）中和反应： 抗体使相应抗原（毒素或病毒）的毒性或传染性丧失的反应 。 抗毒素：使相应毒素失去毒性的抗体。 中和抗体：使相应病毒丧失传染性的抗体。 中和反应应用： 毒素或病毒种型的鉴定与抗原性分析； 抗毒素或中和抗体的效价测定。 四）补体参与的反应 1、反应特点： 抗原抗体复合物激活补体，被活化的补体成分可与抗原 抗体复合物结合；补体被复合物结合后即被消耗。 2、反应类型 1）溶菌反应： 某些革兰氏阳性菌，与相应抗体结合后，形成抗原抗体 复合物，在加入补体，则出现的细菌溶解现象。 2）溶血反应： 红细胞与相应抗体特异性结合后，在有足量补体存在条件 下，出现红细胞溶解的现象。 3）补体结合反应 ： 在补体参与下，并以绵羊红细胞和溶血素（抗绵羊红细胞 的抗体）为指示系统的抗原抗体反应。 3、补体结合反应系统： ① 检（待）测系统： 待测的抗原+ 抗血清（抗体、补体） ② 指示系统： 绵羊红细胞（抗原）+ 溶血素（抗体） ③ 补体系统 豚鼠的新鲜血清 4、反应过程 1、免疫分析的定义： 利用抗原抗体的特异性反应的特性对抗原或抗体进行量和 质的测定分析。 二、 常见免疫分析方法 特异性强 灵敏度高 反应速度快 2、特点： 补体结合阴性反应（－），无待测物 抗原 + 抗血清 + 豚鼠