《医学免疫学与免疫学技术》-IgG抗体的提取及鉴定探究.ppt

实验步骤 5、上样、洗脱、收集洗脱液 上样 流速3ml/10min（记录上样总体积，保留部分血清） 洗脱 流速30-40ml/cm2/h 收集 5ml/管 （20%三氯醋酸滴定、分光光度法检测）6、DEAE-纤维素再生 2M NaCl 洗脱其他血清蛋白 拆柱、 浸泡 PH7.4 0.01M PB液 7、洗脱液抗原性鉴定（双扩散法） 实验步骤 8、洗脱液抗原性鉴定（对流免疫电泳法） 制板 打孔 抗原加于负极端孔，抗体加于正极端孔。 置电泳槽（电压110v），45分钟左右观察结果。 Ag Ab Ag Ab 实验步骤 9、合并含IgG的洗脱液，通过蔗糖包埋法进行浓缩。 10、通过分光光度法对浓缩后的IgG进行回收率的测定。 11、通过免疫电泳检测所获IgG的纯度。 人血清 提纯物 兔抗人血清 双扩散 电泳 + - 12、免疫电泳检测结果观察。 《医学免疫学与免疫学技术实验》 贵阳医学院免疫学教研室 主要实验室规则 按时进实验室，不允许迟到早退 爱护实验室的仪器设备 穿白大衣入实验室，着装整齐，女生束发 禁止在实验室内嬉戏、吃食物、饮水等 实验结束后，认真清洗实验器材、打扫实验室卫生 离开实验室前请洗手 人血清IgG的提取及鉴定 2015年05月 人血清IgG的提取