灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷不同比例联合用药对小鼠免疫功能的不同影响.docVIP

灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷不同比例联合用药对小鼠免疫功能的不同影响 　　【摘要】 目的 以灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷为例，探讨不同配伍比例和剂量联合用药对机体免疫功能的不同影响。方法 以SPF级昆明种小鼠为实验对象，以灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷按A配方2：2：1.5和B配方10：10：1.5组合，每种配方分为低、中、高三个剂量组，同时设置溶剂对照组，连续灌胃给予受试物1个月，然后进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验、NK细胞活性测定实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和血清溶血素的测定实验。结果 与溶剂对照组比较，A配方只有低剂量组能使小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力和血清溶血素抗体积数显著提高；B配方低剂量组显著提高了ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力和NK细胞活性，低、中、高剂量组均能使小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力和血清溶血素抗体积数显著提高，但高剂量组却显著抑制了ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力和NK细胞活性。结论 B配方能够增强机体免疫力，但高剂量会抑制免疫功能。 　　【关键词】 灵芝多糖；红景天苷；西洋参皂苷；免疫功能 　　doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.09.610 文章编号：1004-7484（2013）-09-5285-02 　　随着现代医学的发展，人们逐渐认识到许多疾病的发生、人体衰老及老年人多发病均与免疫系统的紊乱有密切关系。对机体免疫力有促进作用的功能性食品、药品的研究开发，日益受到人们的关注[1]。已有文献报导多种中药组方具有调节机体免疫力的作用[2-4]，市面上也逐渐出现了越来越多的提高机体免疫力的复方制剂，但各组份之间以何种比例配伍为优还未见报导。另外组方中各组份发挥增强免疫功能时使用剂量范围不一致，以灵芝多糖为例，有文献报导10mg/kg和2000mg/kg的灵芝多糖均具有增强免疫力的功能，但也有文献报导大剂量（10mg/kg）灵芝多糖对免疫功能具有抑制作用，而适当剂量（0.05mg/kg）灵芝多糖对免疫功能具有增强作用。然而，目前对药物配伍比例与剂量尚无系统研究，本研究旨在探讨不同配伍比例和剂量联合用药对机体免疫功能的不同影响。 　　许多研究发现，多种中药组份具有良好的免疫调节作用，灵芝、红景天、西洋参是传统医学中的名贵药材，灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷是这三种名贵药材的有效成份，药理研究表明，这三种有效成份都具有提高机体免疫力的作用。本研究选取灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷为受试物，就中药组方的配伍比例和剂量问题，按照卫生部颁布的《保健食品检验与评价技术规范》有关增强免疫力功能的要求，初步探讨不同配伍比例和剂量联合用药对机体免疫功能的不同影响。 　　1 资料与方法 　　1.1 药物与试剂 灵芝多糖购自浙江五养堂药业有限公司；红景天苷购自陕西森弗生物技术有限公司；西洋参皂苷购自惠州市神农本草保健制品有限公司；小牛血清购自Hyclone公司；RPMI-1640细胞培养基购自Gibco公司；3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐（3-（4，5-Dimethylthiazol-2-yl）-2，5-diphenyltetrazolium bromide，MTT）和刀豆蛋白（concanavalin A，ConA）购自Sigma公司；绵羊红细胞（sheep red blood cell，SRBC）购自广州蕊特生物科技有限公司；鸡红细胞（chicken red blood cell，CRBC），抽取静脉血，按常规法制备；其余试剂均为国产分析纯。 　　1.2 实验动物及环境 SPF级昆明种雌性小鼠210只，体重范围为18-22g，由湖北省实验动物研究中心提供。实验动物生产许可证号：SCXK（鄂）2008-0005。动物饲养温度为20-25℃，湿度为40%-70%，实验前适应环境3天。 　　1.3 受试物和动物分组 受试物分为两种不同比例的配方，即A配方和B配方，其中A配方以灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷按2：2：1.5组合，B配方以灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷按10：10：1.5组合，每种配方分别设置低、中、高三个剂量组，见表1。 　　1.4 实验方法 　　1.4.1 ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验 采用MTT法测定小鼠淋巴细胞转化能力，具体实验方法参照《保健食品检验与评价技术规范》，在酶标仪570nm波长处测定吸光度（OD）值，以加ConA孔的OD值减去不加ConA孔的OD值代表淋巴细胞的增殖能力。受试样品组的吸光度值显著高于对照组，可判定该项实验结果为阳性。 　　1.4.2 NK细胞活性测定实验 采用乳酸脱氢酶（LDH）测定法。具体实验方法参照《保健食品检验与评价技术规范》，按以下公