芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠氧自由基代谢及肺组织形态学的影响.docVIP

芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠氧自由基代谢及肺组织形态学的影响 　　摘要：目的 观察芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠肺组织和血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）水平及肺组织病理结构的影响，探讨其阻抑COPD的效应及机制。方法 Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组与芪蛭大、中、小剂量组。采用气管内滴注脂多糖（LPS）加烟熏法复制COPD大鼠模型，造模后第15日开始药物干预，第43日分别检测血清、肺组织SOD、MDA、NO水平及肺组织病理形态的变化。结果 与空白组比较，模型组大鼠肺组织与血清中SOD、NO含量均降低（P0.05），MDA含量明显升高（P0.05）。与模型组比较，芪蛭大、中剂量组肺组织与血清中SOD含量均显著升高（P0.05），芪蛭大、中剂量组肺组织中MDA含量均显著降低（P0.05），芪蛭大、小剂量组血清中MDA含量均显著降低（P0.05），芪蛭大、小剂量组肺组织中NO含量明显升高（P0.05），芪蛭大、中剂量组血清中NO含量明显升高（P0.05）。各治疗组大鼠肺组织形态学改变较模型组减轻。结论 芪蛭皱肺颗粒对COPD大鼠肺组织具有保护作用，提高抗氧化能力、调节NO代谢可能是其干预COPD发生、发展的机制之一。 　　关键词：慢性阻塞性肺疾病；芪蛭皱肺颗粒；超氧化物歧化酶；丙二醛；一氧化氮；大鼠 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.06.014 　　中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）06-0038-03 　　慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种严重的慢性呼吸系统疾病。目前，临床上尚无有效的治疗方法遏制COPD发生、发展。芪蛭皱肺颗粒主要由黄芪、水蛭、党参、丹参等药物组成，前期研究表明，芪蛭皱肺颗粒可减轻COPD模型大鼠肺部炎症反 　　应、改善其呼吸功能、干预COPD模型大鼠小气道重塑等[1-2]。本研究通过观察COPD模型大鼠肺组织、血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量及肺组织病理结构的变化，探讨芪蛭皱肺颗粒有无调节氧化/抗氧化失衡、NO水平及防治COPD的效应。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物 　　SPF级Wistar大鼠60只，雌雄各半，体质量（200±20）g，甘肃中医学院SPF级实验室提供并饲养，动物合格证号：SCXK（甘）2004-0006-0000005。 　　1.2 药物 　　芪蛭皱肺颗粒由黄芪、水蛭、党参等药物组成，甘肃中医学院药物制剂室制备；固本咳喘片，浙江台州南峰药业生产，批号070504。 　　1.3 主要试剂与仪器 　　脂多糖（LPS）购自Sigma公司，批号L-2880；兰州牌香烟（焦油量12 mg，烟气烟碱量0.8 mg，烟气一氧化碳量13 mg）购自甘肃烟草工业有限责任公司；考马斯亮蓝、SOD、MDA、NO试剂盒均购自南京建成生物工程研究所（批号分别2008081220080809）。有机玻璃熏箱48 L（20 cm×40 cm×60 cm，自制），电子分析天平FA2004N（上海精密科学仪器有限公司），组织匀浆器（上海医疗器械公司）；离心机LXJ-80C（上海医疗器械公司），721分光光度计（上海安泰分析仪器有限公司），BL-2000图像分析系统（成都泰盟科技有限公司）。 　　1.4 分组与造模 　　SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组及芪蛭大、中、小剂量组，每组10只。COPD大鼠模型采用气管内滴注LPS加烟熏法复制[3]，分别于第1、14日气管内滴注LPS（0.1 mg/100 g），第2～13日、第15～28日每日上午在48 L的玻璃密闭箱内持续熏兰州牌香烟雾30 min，每日1次，1支/只。本次实验过程中，共死亡动物7只，通过尸检发现主要由造模、灌胃操作不当所致。 　　1.5 给药 　　从造模第15日起，实验动物进行灌胃干预治疗，空白组、模型组分别给予芪蛭皱肺颗粒辅料溶液3 mL；阳性对照组每日给予固本咳喘片（相当原药材0.324 g/kg）；芪蛭小、中、大剂量组每日分别给予不同剂量的芪蛭皱肺颗粒（相当于原药材0.54、1.08、2.16 g/kg）。每日上午灌胃1次，连续28 d。实验药物用量均按体表面积比率换算，用生理盐水配制药液，临床等效剂量为实验中剂量。 　　1.6 肺组织和血清中超氧化物歧化酶、丙二醛及一氧化氮水平测定 　　动物饲养第43日，股动脉采血，处死，分离血清备用；取肺组织制备匀浆，取上清液备用。SOD、MDA检测方法严格按试剂盒说明书进行化学比色检测，NO检测方法严格