第十四章细胞增殖调控讲述.pptVIP

（二）M期周期蛋白与细胞分裂中期向后期转化 后期促进复合物（anaphase-promoting complex，APC）：20S，泛素连接酶（E3），通过泛素依赖性蛋白降解途径，降解M期周期蛋白和中期向后期转换的非周期蛋白类负调控因子，使细胞从中期向后期转换。 APC至少由15种成分组成，分别称为APC1~APC15。APC的发现是细胞周期研究领域中又一重大进展，表明细胞分裂中期向后期转换也受到精密调控。 APC的主要作用：到达分裂中期后，cyclinB/A与CDK1分离，在APC介导下，通过泛素化依赖途径而降解。CDK1活性消失，细胞由分裂中期向后期转化。 （二）M期周期蛋白与细胞分裂中期向后期转化 APC活性受到多种因素的综合调节：① M期CDK激酶和蛋白磷酸酶对APC的活性起着调节作用；② 纺锤体组装检查点调控APC的活性，如cdc20和Mad2（有丝分裂捕获缺陷蛋白2）分别为APC有效的正调控因子和负调控因子，在分裂中期之前，位于动粒上的Mad2与cdc20结合并抑制其活性。到分裂中期，Mad2从动粒上消失，解除对cdc20的抑制作用，促使APC活化，导致M期周期蛋白降解，M期CDK活性丧失。 后期促进复合物（ APC ）作为有丝分裂的终结者 马达蛋白和微管系统共同协作导致染色体分离 Cyclin B的降解途径 （三）G1/S期转化与G1期周期蛋白依赖性CDK 细胞由G1期向S期（G1/S期）转化主要受G1期周期蛋白依赖性CDK：cyclinD-CDK4/6、cyclinE- CDK2和cyclinA-CDK2。 cyclinD-CDK4/6为细胞G1/S期转化所必需：cyclinD包括D1、D2和D3，它们的表达有细胞和组织特异性；cyclinD-CDK4/6的底物主要是Rb蛋白（retinoblastoma protein）即成视网膜细胞瘤蛋白，Rb蛋白是E2F的抑制因子，E2F是促进与G1/S期转化和DNA复制有关的基因转录的转录因子，Rb蛋白在G1/S期转化中起负调控（“刹车”）作用，在G1期的晚期通过磷酸化而失活。 （三）G1/S期转化与G1期周期蛋白依赖性CDK cyclinE-CDK2为S期启动所必需：cyclinE-CDK2的主要作用是去除p107（类Rb蛋白）对E2F的抑制作用，促进G1/S期转化；cyclinE-CDK2是TGF-β的主要靶酶，TGF-β可以有效地抑制cyclinE-CDK2活性，进而将细胞阻止在G1期；cyclinE在肿瘤细胞中的含量比正常细胞中要高得多；在细胞中，提高cyclinE的表达，该细胞则快速进入S期，对生长因子的依赖性降低。 cyclinA-CDK2也可以作用于p107（类Rb蛋白）：除此之外，cyclinA合成虽始于G1/S期转化时期，但cyclinA-CDK2却是S期主要的CDK。 Cyclin D与CDK结合使Rb释放结合的转录因子E2F p53和Rb在细胞周期调节中的作用 G1期周期蛋白是到达S期的一定阶段通过SCF泛素化途径降解的，同时需要G1期CDK的参与：SCF （Skp-cullin-F-box protein）（间期初级活化因子）是一种具有泛素连接酶（E3）功能的多亚基的蛋白复合物（Skp1、Cul1和Rbx1），可以被Skp2、β-Trcp或Fbw7三种F-box蛋白分别活化，而且SCF的底物特异性的识别是由F-box蛋白来决定的；SCF通过降解细胞周期的不同时期的不同的底物从而在整个细胞周期中都发挥作用（但主要在细胞间期G1、S和G2期发挥作用），如降解① G1期周期蛋白（cyclinA、D1和E）（PEST序列对降解起促进作用），② CKI（p21、p27和p57），③ DNA复制调控因子（ORC1和Cdt1）和 ④其它（cdc25a、Wee1和Emi1）。 APC主要在M期和G1期早期发挥作用：APC的2个负责底物识别的因子是cdc20和Cdh1，APC催化的底物见图14-9。 间期初级活化因子（ SCF ）和后期促进复合物（ APC ）在细胞周期中的活动 APC和SCF在细胞周期中的活性及其底物（图14-9） SCF泛素化依赖蛋白质降解途径（图14-10） 其它对DNA复制起始活动进行综合调控的因素： DNA复制的起始并不仅仅是在G1期末的起始点（限制点）处才决定的。早在G1期开始时，许多与DNA复制有关的物质即已表达并与染色质结合，开始了DNA复制的起始调控。 ①ORC（复制起始点识别复合物）： ORC识别DNA复制起始点并与之结合，这是DNA复制起始所必需的；②cdc6和cdc45也是DNA复制所必需的调控因子：cdc6在G1期早期与染色质结合，到S期早期从染色质上解离下来；cdc45约在G1期晚期才与染色质结合，CDK6对cdc45