第四章核酸讲述.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * rRNA与核糖体蛋白结合组成核糖体(ribosome)，为蛋白质的合成提供场所。 细胞内含量最多的RNA(80％)。 rRNA分子为单链，局部有双螺旋区域。 三、核糖体RNA(ribosomal RNA，rRNA) 的结构 原核生物： 核蛋白体70s 小亚基30s 大亚基50s 真核生物： 核蛋白体80s 小亚基40s 大亚基60s 核糖体组成 18S rRNA的二级结构 核内小RNA （small nuclear RNA, snRNA） 核仁小RNA （small nucleolar RNA, snoRNA） 胞质小RNA （small cytoplasmic RNA, scRNA） 催化性小RNA（核酶，ribozyme） 小干扰 RNA （small interfering RNA，siRNA） 微小 RNA（microRNAs, miRNAs ） 四、其他RNA分子 核内小RNA：位于细胞核内。snRNA有5种，分别称为U1、U2、U4、U5、U6，它们与多种蛋白形成复合体，参与真核细胞hnRNA的内含子加工剪接。 核仁小RNA：定位于核仁，参与rRNA前体的加工和核糖体亚基的装配。 胞质小RNA：存在于细胞质中，参与形成信号识别颗粒，引导含有信号肽的蛋白质进入内质网定位合成。 催化性小RNA：细胞内具有催化功能的一类小分子RNA，具有催化特定RNA降解的活性，在RNA的剪接修饰中具有重要作用。 小干扰RNA：是生物宿主对于外源侵入基因表达的双链RNA进行切割所产生的具有特定长度（21～23 bp）和特定序列的小片段RNA。这些siRNA可以单链形式与外源基因表达的mRNA相结合，并诱导相应mRNA降解。 微小RNA（microRNAs, miRNAs ） 是一类长度为22nt左右的内源性sncRNA。miRNAs主要是通过结合mRNA而选择性调控基因的表达。 核酸的理化性质 第四节 一、核酸的大小和测定 生物越高等，DNA分子越大， 但进化的复杂程度 与DNA大小并不完全一致。 大小测定： 电泳法 — 琼脂糖凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳 超速离心法 序列测定： 双脱氧DNA链末端合成终止法 （—） （＋） 1 2 3 500bp 3000bp 1000bp 不同生物DNA分子大小 生 物 碱基对/ kb 总长度/ μm 形 状 病毒 多瘤病毒 5.1 1.7 环状 SV40 5.2 1.8 环状 M13 6.4 1.9 环状 Φ X174 5.4 1.8 环状 fd 6.4 1.9 环状 P4 6.4 1.9 环状 T7