分子生物学复习.docVIP

一、名词解释： 1、基因诊断：通过检测基因的结构异常或其表达异常，对人体的健康状态和疾病做出诊断的方法。 2、基因治疗：狭义概念：将具有正常功能的基因置换或增补患者体内有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。 广义概念：将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，最终达到治疗疾病的目的。 3、基因重叠：即同一段DNA片段能够编码两种甚至三种蛋白质分子，其使较小的基因组能够携带较多的遗传信息DNA中。基因重叠的方式（1）完全重叠:一个基因完全在另一个基因里面。（2）部分重叠:几个基因部分重叠。（3）两个基因之间只有一个碱基重叠。 可以认为是病毒基因组的结构特点 不连续的 5、荧光定量PCR：基于荧光能量传递技术，通过受体发色团之间偶极-偶极相互作用,能量从供体发色团转移到受体发色团，受体荧光染料发射出的荧光讯号强度与DNA产量成正比，检测PCR过程的荧光讯号便可得知靶序列初始浓度。 6、生物大分子：是指生物体内由分子量较低的基本结构单位首尾相连形成的多聚化合物。 7、变性：在某些理化因素的作用下，维系DNA分子二级结构的氢键和碱基堆积力受到破坏，DNA由双螺旋变成单链过程。 8、融解温度：在热变性过程中，紫外吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度或融解温度 9、复性：指变性 DNA 在适当条件下，二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象，它是变性的一种逆转过程。 10、核酸分子杂交：两条DNA链或两条RNA链或一条DNA链和一条RNA链按碱基互补的原则缔合成异质双链的过程称为分子杂交或核酸分子杂交。 11、原位杂交：是以特定标记的已知序列的核酸分子作为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交并对其检测的方法。 12、限制性核酸内切酶：是识别DNA的特异序列, 并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。 13、载体vector：指能携带外源DNA片段导入宿主细胞进行扩增或表达的工具。载体的本质为DNA，其包括克隆载体和表达载体。 14、质粒plasmid：是指细菌染色体以外的小分子环状双链DNA，能自我复制和表达其携带的遗传信息。 15、基因工程，又称为 重组DNA技术，是按着人们的科研货生产需要，在分子水平上，用人工方法提取或合成不同生物的遗传物质（DNA片段），在体外切割，拼接形成重组DNA,然后将重组DNA与载体的遗传物质重新组合，再将其引入到没有该DNA的受体细胞中，进行复制和表达，生产出符合人类需要的产品或创造出生物的新性状，并使之稳定地遗传给下一代 二、问答题： 1、肿瘤的分子诊断策略和方法有哪些？ ①检测肿瘤相关基因：包括癌基因、抑癌基因、肿瘤转移基因、肿瘤转移抑制基因。②检测肿瘤相关病毒的基因：病毒与人类肿瘤之间确实存在着密切的关系，如肝炎病毒（HBV、HCV）与肝细胞癌、EB病毒与鼻咽癌等。利用分子诊断的方法如杂交、PCR等方法检测这些肿瘤相关病毒的基因，就可以为某些肿瘤的诊断提供参考依据。③检测肿瘤标志物：肿瘤标志物（Tumor Marker）是肿瘤组织由于癌基因或抑癌基因和其它肿瘤相关基因及其产物异常表达所产生的抗原和生物活性物质，在正常组织和良性疾病时几乎不产生或产量甚微，反映了肿瘤的发生发展过程及肿瘤相关基因的激活或失活程度，可在肿瘤患者组织、体液、排泄物中检测出来。其方法包括PCR、核酸杂交、基因芯片、bDNA 、NASBA、测序、PCR-ELISA等 2、基因治疗中应用的基因转运载体有哪些？ 基因转运是基因治疗关键步骤之一，是将治疗基因高效转移入患者体内、并能调控其适度表达。常用的载体有两类：病毒载体和非病毒载体。病毒载体：逆转录病毒、腺病毒、疱疹病毒、腺相关病毒、痘苗病毒载体、HIV病毒载体、杆状病毒载体等；非病毒载体：脂质体、分子耦联载体、裸露质粒DNA、染色体载体、多聚物、其他新型载体 ：1）细胞转导肽( Transduction peptide) 介导基因导入系统 2）纳米微生物技术基因治疗载体 。 3、基因组计划的完成对未来医学发展的影响 ① 致病基因的发现，全基因组扫描：②个体化医疗，包括肿瘤放化疗，易感病人的及早预防, 药物反应不同；③基因治疗:遗传病的诊断和治疗 4、病毒基因组的特点 ①病毒基因组基因组很小，且大小相差较大；②病毒基因组可以由DNA组成，或由RNA组成；③多数RNA病毒的基因组是由连续的RNA链组成；④基因重叠；⑤基因组的大部分可编码蛋白质，只有非常小的一部份不编码蛋白质；⑥形成多顺反子结构；⑦病毒基因组都是单倍体（逆转录病毒除外）；⑧噬菌体（细菌病毒）的基因是连续的，而真核细胞病毒的基因是不连续的。 5、HBV基因组特点和复制 特点：乙肝病毒（HBV）是目前已知的感染人类的最小的双链DNA病毒；HBV的基因组结构显