高效液相色谱实验课件.pptVIP

实验名称液相色谱法测定混合样品中的苯和甲苯 色谱分析基础一、 色谱法的特点和分类 Principles of chromatography 2.色谱法的分类 Other chromatographic methods: 3.色谱法的特点 二、色谱流出曲线与术语 Information from an export curve 由色谱流出曲线可以实现以下目的： （1）根据色谱峰的数目，可以判断试样中所含组分的最少个数。 （2）根据色谱峰的保留值进行定性分析。 （3）依据色谱峰的面积或峰高进行定量分析。 （4）依据色谱峰的保留值以及峰宽评价色谱柱的分离效能。 定性与定量分析 一.定性分析qualitative analysis 二. 定量分析quantitative analysis(1)色谱的定量基础For same detector, different substance have different response sensitivity.  、 是校正因子quantitative calibration factor，这是色谱定量分析的依据 （2）定量分析方法quantitative analysis methods 高效液相色谱仪 主要部件 (2) 进样装置 (3) 高效分离柱 (4) 液相色谱检测器 二、仪器和试剂 三、实验步骤 实验步骤 实验步骤 * * 一、实验目的 1．掌握液相色谱法的基本原理及方法，熟悉 仪器的基本组成。 2．初步掌握液相色谱法的分析技术。 1、概述 俄国植物学家茨维特（Tswett)在1903年使用的装置：色谱原型装置，如图。 试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。 其中的一相固定不动，称为固定相； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 色谱法是一种分离分析技术。 当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序从色谱柱中流出。 与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 By the types of mobile phase stationary phase (1) gas chromatography (GC)气相色谱：流动相为气体（称为载气）。 按固定相的不同又分为：气固色谱(GSC)和气液色谱(GLC) 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； (2) liquid chromatography (LC)液相色谱：流动相为液体（也称为淋洗液 eluent ）。 按固定相的不同分为：液固色谱(LSC)和液液(LLC)色谱。 By stationary’s forms： (1)column chromatography packed column and capillary column (2) plannar chromatography paper and thin layer By separation mechanism (1) adsorption chromatography 吸附色谱 (2) distribution chromatography 分配色谱 (3) ion exchange chromatography 离子交换色谱 (4) size exclusion chromatography 尺寸排阻色谱 超临界色谱super critical: CO2流动相。 高效毛细管电泳 capillary electrophoresis: 九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器。 （1）high separation efficiency 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。 （2） high sensitivity 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。 （3） short analysis time 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 （4） wide application 气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。 1.b