高相液相色谱-质谱联用技术及实例课件.pptVIP

高效液相色谱-质谱联用技术 (HPLC-MS) 一、概述 三、高效液相色谱-质谱联用 (HPLC-MS) 自1957年首次出现GC-MS联用以来， GC-MS得到了迅速发展和广泛的应用，然而实际分析中，只有20%左右的样品可以通过GC-MS进行分析，绝大多数化合物由于具有极性大、低挥发度、高分子量或不稳定性等特点，不能够采用这一方法进行分析，但是可以通过HPLC-MS来完成。 LC-MS (离子阱)联用仪器结构示意图 简介：通过运用液—质联用法的高分辨率质谱能够精确测得化合物的分子质量，进而获得化合物分子式，而多级质谱在给出的化合物的裂解碎片的情况下，结合相关文献可以快速的鉴定其中大部分化合物结构。 三、HPLC-MS联用的应用 ◇在双酚A,壬基酚及表面活性剂分析中的应用 ◇在食品中兽药残留和毒素分析中的应用 ◇在食品及饮用水中农药残留检测中的应用 ◇天然产物分析或中草药的品质控制 ◇化妆品中违禁激素的测定 ◇保健食品中违禁药物的检测 * * 色谱：化合物分离 质谱：纯物质结构分析 实例分析 液—质联用分析锦绣杜鹃叶黄酮类成分 黄酮类化合物 一级质谱中大多以准离子分子形式存在，有少量碎片离子。二级质谱中碎片信息则较少，主要峰的质谱图见图 3 ～7。根据分析液相中的色谱峰与总离子流图中所对应的离子峰的质谱信息，并结合相关文献的报道，对锦锈杜鹃 HPLC 分离出的5 个主要峰进行分析，推断出其可能的结构 。 质谱负离子模式的总离子流图与 356 nm 波长下紫外色谱图基本吻合，但总离子流图的基线噪声较大。 结果分析 化合物1: 色谱峰 1 在 22.3 min 时的1 级质谱给出准分子离子峰 m/z 463.2 ［M-H ]－; 2 级质谱给出的主要碎片离子峰 m/z 301.1， 可能是分子离子峰失去1 个半乳糖的槲皮素苷元碎片的离子峰［( M-H) -162 ]－，且符合金丝桃苷的裂解规律，并结合文献推断为槲皮素 -3 -O -半乳糖苷，即金丝桃苷，且与对照品数据一致。 化合物2: 色谱峰 2 在 23.6 min 时的1 级质谱给出准分子峰 m/z 301.1 可能是分子离子峰失去1 个葡萄糖基的槲皮素苷元碎片的离子峰［( M - H) -162］－，符合异槲皮苷的裂解规律，并结合文献推断为槲皮素 -3 -O - 葡萄糖苷，即异槲皮苷，且与对照品数据一致。 化合物3: 色谱峰 3 在 26.8 min 时的 1 级质谱给出准分子离子峰 m/z 433.2 ［M - H]-; 2 级质谱给出的主要碎片离子峰 m/z 301.0 可能是分子离子峰失去1 个阿拉伯糖基的槲皮素苷元碎片的离子峰［( M - H) -132]－，符合广寄生苷的裂解规律，并结合文献推断为槲皮素 －3 －O －阿拉糖苷，即广寄生苷( 萹蓄苷)。 结论 试验结合国内外研究结果，用 WatersC18( 4.6 mm ×250 mm，5 μm) 色谱柱，在无水甲醇和水的流动相梯度洗脱，检测波长356 nm，流速为0.7 ml/min，柱温30℃ 条件下可以使锦锈杜鹃叶中的黄酮类化合物得到很好的分离。在此基础上，通过与电喷雾离子阱质谱联用，获得了各成分的 1 级质谱的准分子质量，2 级质谱的碎片等化学结构信息。结合文献与标准品的对比，初步鉴定了其中的 5 个化合物。 *