高效液相色谱法测定妇康宁片中阿魏酸的含量.docVIP

高效液相色谱法测定妇康宁片中阿魏酸的含量 　　[摘要] 目的 建立高效液相色谱法测定妇康宁片中阿魏酸含量的方法。 方法 色谱柱为SinoChrom ODS-BP C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.1%磷酸（22∶78）；流速：1.0 ml/min；检测波长：316 nm；柱温：25℃。 结果 阿魏酸在0.0014～0.0280 mg/ml范围内呈良好的线性关系（r=0.9998），平均回收率为99.2%，RSD=1.0%（n=6）。 结论本方法操作简单、快速，可用于测定妇康宁片中阿魏酸的含量。 　　[关键词] 高效液相色谱；妇康宁片；阿魏酸；含量测定 　　[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）10（a）-0071-03 　　妇康宁片收载于《中华人民共和国卫生部药品标准（中药成方制剂）》第一册[1]，处方由白芍、当归、香附、三七等8味中药组成，具有调经养血、理气止痛的功效。用于气血两亏、经期腹痛等症。当归为方中主药，具有补血活血、调经止痛、润肠通便等功效[2]，阿魏酸是当归的有效成分之一，具有多方面的生物活性[3]，许多生药及其制剂常选用阿魏酸的含量作为其质量控制指标。目前相关文献仅报道了妇康宁片的定性鉴别和君药白芍中芍药苷的含量测定[4-5]，对于阿魏酸的含量没有明确的要求。为了保证药品质量，本研究建立了妇康宁片中阿魏酸的高效液相色谱含量测定方法。 　　1 材料与方法 　　1.1 仪器与试剂 　　大连依利特高效液相色谱仪（UV230+紫外-可见检测器，EC2000工作站）；CP225D电子天平（德国Sartorius公司）；KQ-500型超声仪（KQ-500型超声仪）。 　　阿魏酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110773-200611）；妇康宁片（亚宝药业四川制药有限公司，批号：110501，110502，110503）；乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 色谱条件 　　色谱柱：SinoChrom ODS-BP C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相：乙腈-0.1%磷酸（22∶78）；流速：1.0 ml/min；检测波长：316 nm；柱温：25℃；进样量：20 μl。在此色谱条件下，阿魏酸分离效果好，阿魏酸峰与其他组分峰的分离度均1.5，保留时间合适，峰形较好，理论板数按阿魏酸峰计算应≥5000。 　　1.2.2 溶液的制备 　　1.2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取硅胶干燥至恒重的阿魏酸对照品7.03 mg置于25 ml棕色量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得0.28 mg/ml的对照品溶液。 　　1.2.2.2 供试品溶液的制备 取妇康宁片20片，研成细粉，取约6.0 g药粉，精密称定，加水50 ml使溶解，用稀盐酸调pH值为1～2，乙醚萃取4次，每次20 ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加70%甲醇溶解并定容至10 ml，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。 　　1.2.2.3 阴性对照溶液的制备 按处方比例称取除当归的其他药味，依照妇康宁片的生产工艺制成缺当归的阴性制剂，再按供试品溶液的制备方法制成缺当归的阴性对照溶液。 　　2 结果 　　2.1 专属性试验 　　取阿魏酸对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各20 μl进样测定，得到相应的色谱图。结果表明，妇康宁片中其他成分对阿魏酸的含量测定不产生干扰（图1）。 　　2.2 线性关系考察 　　分别吸取0.28 mg/ml阿魏酸对照品溶液50、100、200、400、600、800、1000 μl，分别置于10 ml棕色量瓶中，加70%甲醇定容至刻度，摇匀，得0.0014、0.0028、0.0056、0.0112、0.0168、0.0224、0.0280 mg/ml的系列对照品溶液，分别进样20 μl测定。以阿魏酸的浓度（X）对峰面积积分值（Y）进行线性回归，得回归方程：Y=94 133 781.58X+7 093.1（r=0.9998）。结果表明，阿魏酸浓度在0.0014～0.0280 mg/ml范围内，线性良好。 　　2.3 精密度试验 　　精密吸取“1.2.2.1”项下对照品溶液20 μl，重复进样6次，按“1.2.1”项下色谱条件测定各峰面积，结果阿魏酸的平均峰面积为979 642.62，RSD值为0.89%，表明仪器精密度良好。 　　2.4 稳定性试验 　　取同一供试品溶液（批号：110501），分别于0、2、4、6、8、12 h进样测定，结果提示，阿魏酸峰面积的RSD值为0.87%，表明供试品溶液在12 h内稳定性良好。