细胞病理学发展趋势.pptVIP

痰P53突变检测 痰细胞学和P53、ras突变检测诊断肺癌 51例肺癌和32例肺部良性疾病患者 分组 痰细胞学 P53突变 Ras突变 DNA倍体异常 肺癌 19（37.3%） 27（45.1%） 10（19.6%） 15（29.4%） 非肺癌 0 1（3%） 2（6%） 0 原位ＰＣＲ 原位聚合酶链式反应（Is-PCR）是 由Haase等 于1990年首创。它是利用完整的细胞作为一个微小的反应体系来扩增细胞内的目的片段, 在不破坏细胞的前提下, 利用一些特定的检测手段来检测细胞内的扩增产物。直接用细胞涂片或石蜡包埋组织切片在单个细胞中进行ＰＣＲ扩增。可进行细胞内定位。适用于检测含量较少的靶序列。 既往鉴定细胞内特异序列一般采用原位杂交（ISH）,但在每个细胞中目的片段的拷贝数少于10的情况下,该方法的敏感度就明显下降。而标准的PCR则可扩增出细胞内单拷贝的序列,敏感度很高, 但却未能与细胞形态学研究相结合。ISPCR则可把这两者结合起来, 成为细胞学诊断中一种崭新的检测技术。利用该法可检测细胞内病毒感染、细胞内基因重排、以及分析细胞内RNA表 达产物等方面发挥一定作用。 存在的问题： ①特异性不高，特别是假阳性的问题。产生的原因有引物与模板的错配、在扩增中因细胞内受损伤DNA的修复而形成的非特异性序列和特异性扩增序列的弥散等。 ②技术操作复杂，影响