气相色谱法测定参苓白术散中樟脑、龙脑及乙酸龙脑酯含量.docVIP

气相色谱法测定参苓白术散中樟脑、龙脑及乙酸龙脑酯含量 　　摘要：目的 采用气相色谱法测定参苓白术散中樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯的含量，并建立其质量标准。方法 采用100%甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱；程序升温：起始温度60 ℃，以5 ℃/min升到130 ℃，保持5 min，续以20 ℃/min升到230 ℃，保持5 min。结果 樟脑平均回收率为99.87%，RSD=1.3%，进样量在0.003 77～0.150 8 ?g范围内呈良好的线性关系（r=0.999 9）；龙脑平均回收率为100.71%，RSD=2.1%，进样量在0.002 411～0.096 4 ?g范围内呈良好的线性关系（r=0.999 9）；乙酸龙脑酯平均回收率为101.95%，RSD=1.3%，进样量在0.003 02～0.121 1 ?g范围内呈良好的线性关系（r=0.999 9）。结论 本方法操作简便，结果可靠、准确，能有效控制参苓白术散中砂仁的质量。 　　关键词：参苓白术散；砂仁；樟脑；龙脑；乙酸龙脑酯；气相色谱法 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.12.021 　　中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）12-0056-03 　　参苓白术散出自《太平惠民和剂局方》，2009年收载入《国家基本药物目录》，现收载于2010年版《中华人民共和国药典》（一部）。处方由人参、茯苓、白术、山药、白扁豆、莲子、薏苡仁、砂仁、桔梗、甘草共10味药组成，为全原粉入药，有补脾胃、益肺气的功效，主要用于脾胃虚弱，食少便溏，气短咳嗽，肢倦乏力[1]。其中砂仁有醒牌和胃、行气化滞的功效，其挥发性成分为有效成分，在制剂中发挥其药理作用。砂仁的主要成分为龙脑、樟脑、乙酸龙脑酯，可选择以上3种作为指标性成分，测定其含量，达到控制砂仁药材质量的目的[1]。目前参苓白术散质量标准未收载含量测定项，有文献报道对处方中人参、甘草的含量进行了研究[2-3]，但未对砂仁的有效成分进行测定。本试验建立参苓白术散中龙脑、樟脑、乙酸龙脑酯的含量测定方法，并对收集到的13家企业生产的29批制剂进行测定，为控 　　制其质量提供依据。 　　1 仪器与试药 　　Agilent 6890气相色谱仪（美国安捷伦公司），氢火焰离子检测器（FID，美国安捷伦公司）；Mettler Toledo AG135十万分之一电子分析天平（瑞士METTER公司）。 　　樟脑对照品（供含量测定用，批号110747-201008，按99.0%计）、龙脑对照品（供含量测定用，批号110881-200706，按99.2%计）、乙酸龙脑酯对照品（供含量测定用，批号110759-200303），均由中国药品生物制品检定所提供。试剂均为分析纯，水为去离子水。参苓白术散为市售的13家企业生产样品的抽样29批（生产企业以字母代替，批号以数字代替）。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　100%甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱，程序升温（起始温度60 ℃，以5 ℃/min升到130 ℃，保持5 min，续以20 ℃/min升到230 ℃，保持5 min），柱流量1.1 mL/min，分别设定进样 　　口、FID检测器温度为300 ℃[4-6]。 　　2.2 对照品溶液的制备 　　精密称取樟脑对照品9.52 mg，置10 mL容量瓶中，加乙酸乙酯使溶解，并稀释至刻度，作为樟脑贮备液。精密称取龙脑对照品12.15 mg，置10 mL量瓶中，加乙酸乙酯使溶解，并稀释至刻度，作为龙脑贮备液。精密称取乙酸龙脑酯对照品30.27 mg，置100 mL量瓶中，加乙酸乙酯使溶解，并稀释至刻度，作为乙酸龙脑酯贮备液。精密吸取樟脑贮备液2 mL、龙脑贮备液1 mL、乙酸龙脑酯贮备液各5 mL，置50 mL量瓶中，加乙酸乙酯使溶解并稀释至刻度，摇匀，即为混合对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　取本品6 g，精密称定，至圆底烧瓶中，连接挥发油提取器，加水200～300 mL，并从发油提取器上方加入乙酸乙酯1 mL，加热回流1 h。吸取挥发油提取器中乙酸乙酯液置5 mL容量瓶中，再用乙酸乙酯3 mL分次洗涤挥发油提取器，并入5 mL量瓶中，用乙酸乙酯稀释至刻度。色谱图见图1。 　　2.4 空白试验 　　按处方中药味比例，配制不含砂仁的诸药，按其制法制成空白制剂，按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液，按上述色谱条件测定，进样量1 ?L。结果阴性对照溶液在与樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯对照品相同保留时间处，未显示色谱峰，认为无干扰。见图1。 　　2.5 线性关系考察 　　精密吸取含0.037 70 mg/mL樟脑对照品、0.0241