实验设计67844.docVIP

玫瑰精油优化提取实验方案设计 1.各种方法辅助水蒸气蒸馏法精油产率实验探索 包括超声波辅助水蒸气蒸馏法提取、微波辅助水蒸气蒸馏法提取、生物制剂辅助水蒸气蒸馏法提取。 玫瑰栽培实验设计 2.探究各种预处理方法对玫瑰精油提取的影响 1、采摘：玫瑰花采摘时间与玫瑰精油的含量有很大关系，一般清晨5-7时，含油量最高，最适宜的气温为15-23℃，相对湿度55-70%。花开放程度不同含油量也不同，在花开至呈半杯状、花蕊黄色时，含油量最高。 2、运输：采摘完后运输过程中要注意使用通风好的盛器，以花篮、麻袋为好，要自然装满，不要挤压，免得生热损失油分。 3、加工前预处理：称取100 g 玫瑰花瓣6份，分别作以下处理（见下表），然后分别用水蒸气蒸馏法提取精油。 组别 1 2 3 4 5 6 处理 水处理10min β—葡萄糖苷酶处理10min 纤维素酶（去纤维素)处理10min 纤维素酶及果胶酶处理10min 纤维杆菌发酵6天 乙烯处理10min 4、水蒸气蒸馏法提取流程 仪器 水蒸汽蒸馏装置，自制; 电子分析天平，梅特勒-托利多仪器( 上海) 有限公司 4.1 按料液比1:4放入250 mL 的圆底烧瓶中。 4.2 按图1 所示安装蒸馏装置。 图1 水蒸气蒸馏实验装置图 （A- 水蒸气发生器；B- 安全管；C- 水蒸气导管；D- 三口圆底烧瓶； E- 溜出液导管；F- 冷凝管） 4.3 通人蒸汽前, 应该先预热放好原料的圆底烧瓶至微沸通入蒸 汽、收集馏出液。蒸馏结束的标志是冷凝器中不再有油珠滴出为止，大约需1.5-2 小时。 4.4 向收集瓶里乳白色的乳浊液中加入质量浓度为0.1g/mL 的氯化 钠溶液，使乳化液分层。分液收集下层的玫瑰精油。向精油中加入少量无水硫酸钠，吸去水分，放置过夜。 4.5 计算玫瑰精油得率，从而知道哪种预处理方法最有利于玫瑰精油的提取。 玫瑰精油得率=玫瑰精油质量( g)/新鲜玫瑰花质量( g) × 100% 3.玫瑰优良栽培方法探究 种苗繁殖方法： 传统生产上玫瑰的繁殖可用分株、埋根、嫁接、嫩枝扦插等方式已十分成熟，传统方法所需周期长，产量有限，远远不能满足市场需求。本次实验，我们采用组培进行快繁。由于最佳增殖培养基 以及最佳生根培养基并未有明确报道，本次实验将设计这两部分。 1. 增殖培养 经过初代培养可获得一定数量的组培苗，为满足工厂化生产的需求，需进行增殖培养。增殖系数是衡量增殖培养的重要指标之一。植物生长调节物质的种类、浓度以及植物生长调物质之间的合理搭配成为筛选最佳增殖培养基的重要指标。 以 MS培养基为基本培养基，按照表1的增殖培养基设计方案，将初代培养 30 d的玫瑰组培苗，切为约 1 cm长的茎段，分别接种于增殖培养基上，每处理接种 30瓶，每瓶接种外植体 4个，30 d 后统计平均苗高。重复 3 次。 表一：增值培养基正交试验设计方案 培养基 medium A 6-BA(mg/L) B NAA(mg/L) C GA3(mg/L) J 1 1 1 1 J2 1 2 2 J3 1 3 3 J4 2 1 2 J5 2 2 3 J6 2 3 1 J7 3 1 3 J8 3 2 2 J9 3 3 2 2. 生根培养基的筛选 玫瑰在组培过程中，其生根能力因品种特性、所用植物材料及培养基成分而有较大差异，许多研究结果表明，发育成熟的玫瑰茎段在微繁殖中容易生根，使用植物激素 IAA，IBA或 NAA含量 1～5mg/L，蔗糖含量 2%～25%的MS 培养基有也利于玫瑰茎段生根。 以1/2MS培养基为基本培养基，采用 2因素 3水平正交 ，按照表2的增殖培养基设计方案，将增殖培养 30 d 的玫瑰约 1 cm 长的组培苗顶梢接种于生根培养基上，每处理接种 30瓶，每瓶接种外植体 4个，20 d 后统计平均根长、平均根数、平均根条数，计算生根指数。重复 3次。 表二：生根培养基正交试验设计方案 培养基 medium A 6-BA(mg/L) B NAA(mg/L) C GA3(mg/L) S 1 1 1 1 S2 1 2 2 S3 1 3 3 S4 2 1 2 S5 2 2 3 S6 2 3 1 S7 3 1 3 S8 3 2 2 S9 3 3 2 实验总流程图： 活体玫瑰精油挥发量测定 在同一块土地上建立五个大棚温室，在里面种上从同一产地购买的生长状况、大小比较一致的玫瑰 2、待玫瑰成活后，对大棚温室的温度和湿度作不同控制（如下表）。 组别 1 2 3 4