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专题1 ? 基因工程
基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过_________________,赋予生物以_____________,创造出__________________________。基因工程是在 _____________上进行设计和施工的,又叫做_____________。
(一)基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”——__________________________
(1)来源:主要是从_____________中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种_____ _的核苷酸序列,并且使每一条链中 ______ _部位的两个核苷酸之间的_____________断开,因此具有_____ 性。
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:
________ _和 _______ _
2.“分子缝合针”——_________
(1)两种DNA连接酶( 和 )的比较:
①相同点:都缝合_______ __键。
②区别:E·coliDNA连接酶来源于_______ __,只能将双链DNA片段互补的_______ 之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合_______ ,但连接平末端的之间的效率较_ 。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将______ ___加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接____ _____的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——______ ___
(1)载体具备的条件:①___________________________。
②___________________________。
③___________________________。
(2)最常用的载体是___ __,它是一种裸露的、结构简单的、独立于 ,并具有_________ 能力的_____ ___DNA分子。
(3)其它载体:_______________________ ____
(二)基因工程的基本操作程序
第一步:_________________ _
1.目的基因是指: 。
2.原核基因采取 获得,真核基因是______ ___。人工合成目的基因的常用方法有________ _和______ ___。
3.PCR技术扩增目的基因
(1)原理:_______ __
(2)过程:第一步:加热至90~95℃使______ __;
第二步:冷却到55~60℃,____________ __;
第三步:加热至70~75℃,热稳定 酶从 起始互补链的合成。
第二步:__________ _____
1.目的:使目的基因在受体细胞中___ __ _,并且可以 ,使目的基因能够 。
2.组成:________ __+____ ______+______ ____+________ __
(1)启动子:是一段有特殊结构的 ,位于基因的________ __,是______ __ __酶识别和结合的部位,能驱动基因 ,最终获得所需的 。
(2)终止子:也是一段有特殊结构的 ,位于基因的 。
(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中 ,从而将 筛选出来。常用的标记基因是_______ ___。
第三步:____________________
1.转化的概念:是 进入 内,并且在受体细胞内__ __ _和____ _的过程。
2.常用的转化方法:
将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 _______,其次还有___ ___和 __ __等。
将目的基因导入动物细胞:
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