选择适当的色谱柱和流动相,开泵,冲洗柱子,待柱子达到平衡而且基线平直后,用微量注射器把样品注入进样口,流动相把试样带入色谱柱进行分离,分离后的组分依次流入检测器的流通池,最后和洗脱液一起排入流出物收集器。当有样品组分流过流通池时,检测器把组分浓度转变成电信号,经过放大,用记录器记录下来就得到色谱图。色谱图是定性、定量和评价柱效高低的依据。 液相色谱分离系统也由两相----固定相和流动相组成。被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。作用力的大小,决定色谱过程的保留行为。 高效液相色谱仪(HPLC)维护保养 仪器环境: —实验室的温度、湿度、酸度等 —实验室震动、灰尘等问题 使用条件: —流动相选择(水、有机溶剂) —样品状态(定容溶剂、样品净化程度) —色谱柱选择(C8、C18) 硬件问题: —输液泵 —进样器 —检测器 高效液相色谱仪(HPLC)维护保养 1 使用流动相尽量要清洁; 2 进液处的砂芯过滤头要经常清洗(定期(如半个月)在稀硝酸溶液中超声、清洗过滤器,保持过滤器畅通无阻); 3 流动相交换时要防止沉淀; 4 避免泵内堵塞或有气泡(进行泵的干抽和湿抽
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