生化蛋白质生物合成2.pptVIP

1．与模板mRNA和起始tRNA结合位点：主要与小亚基有关。 2．三个不同的tRNA结合位点： ⑴A位：又称氨酰基位，可与新进入的氨基酰tRNA结合；由大、小亚基成分构成。 ⑵P位：又称肽酰基位，可与延伸中的肽酰基tRNA结合；由大、小亚基成分构成。 ⑶E位：又称排出位，空载tRNA脱离核蛋白体前的结合位点；主要由大亚基成分构成。 3. 转肽酶活性：将P位上的肽酰基转移给A位上的氨基酰tRNA，形成肽键；由大亚基成分构成。 4. GTPase活性：水解GTP，获得能量；分别由大、小亚基成分构成。 5. 起动因子、延长因子及释放因子的结合位点：分别由大、小亚基成分构成。 二、真核生物起始氨基酰-tRNA是Met-tRNAiMet 第三节肽链的生物合成过程 The Biosynthesis Process of Peptide Chain 肽链的生物合成过程是翻译的中心环节。翻译时，从mRNA的起始密码子AUG开始，按5ˊ→3ˊ方向逐一读码，直至终止密码子。于是，合成中的肽链从起始甲硫氨酸开始，从N-端→C-端延长，直至终止密码子前一位密码子所编码的氨基酸。 一、原核生物的肽链合成过程 起始(initiation) 延长(elongation) 终止(termination ) 原核生物mRNA在核蛋白体小亚基上的准确定位和结合涉及两种机制： 在各种mRNA起始AUG上游约8～13核苷酸部位，存在一段由4～9个核苷酸组成的一致序列，富含嘌呤碱基，如-AGGAGG-，称为Shine-Dalgarno序列(S-D序列)，又称核蛋白体结合位点(ribosomal binding site, RBS)。一条多顺反子mRNA序列上的每个基因编码序列均拥有各自的S-D序列和起始AUG。 指在mRNA模板的指导下，氨基酸依次进入核蛋白体并聚合成多肽链的过程。 EF-G有转位酶（translocase）活性，可结合并水解1分子GTP，释放的能量促进核蛋白体向mRNA的3′侧移动，使起始二肽酰-tRNA-mRNA相对位移进入核蛋白体P位，而卸载的tRNA则移入E位。 核蛋白体沿mRNA链滑动，不断使多肽链延长，直到终止信号进入A位。 1．识别：RF识别终止密码，进入核蛋白体的A位。? 2．水解：RF使转肽酶变为酯酶，多肽链与tRNA之间的酯键被水解，多肽链释放。 3. 脱离：模板mRNA、RF以及空载tRNA与核蛋白体脱离。 ?4.在IF作用下，核蛋白体分出大、小亚基。 四、真核生物翻译的一些特点 起始Met不经过甲酰化 起始密码子只能是AUG(原核也可以是GUG)，无SD序列 3 翻译起始因子多 4 合成过程需ATP、延长因子少、释放因子少，一种eRF 5 线粒体存在独立的蛋白质合成体系 蛋白质合成过程小结 肽链合成方向N C（同位素证明） 以mRNA的5’-3’方向阅读遗传密码 该合成过程是一个耗能过程 第四节蛋白质翻译后修饰和靶向输送 Posttranslational Modification and Targeting Transfer of Protein 新生多肽链不具备蛋白质的生物学活性，必须经过复杂的加工过程才能转变为具有天然构象的功能蛋白质，这一加工过程称为翻译后修饰(posttranslational modification)。 翻译后修饰包括多肽链折叠为天然的三维构象及对肽链一级结构的修饰、空间结构的修饰等。翻译后修饰使得蛋白质组成更加多样化，从而使蛋白质结构上呈现更大的复杂性。 蛋白质合成后被定向输送到其发挥作用的靶位点的过程称为蛋白质的靶向输送(protein targeting)。 一、多肽链折叠为天然构象的蛋白质 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后完成，新生肽链N-端在核蛋白体上一出现，肽链的折叠即开始。可能随着序列的不断延伸肽链逐步折叠，产生正确的二级结构、模序、结构域到形成完整空间构象。 一般认为，多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息，即一级结构是空间构象的基础。 细胞中大多数天然蛋白质折叠都不是自动完成，而需要其他酶和蛋白质辅助。 几种有促进蛋白质折叠功能的大分子: 分子伴侣 (molecular chaperon) 蛋白质二硫键异构酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 3. 肽-脯氨酰顺反异构酶 (peptide prolyl-cis-trans isomerase, PPI) （二）分泌型蛋白质由分泌小泡靶向输送至胞外 真核细胞分泌型蛋白质的靶向输送过程为：核蛋白体上合成的肽链先由信号肽引导进入内质网腔并被折叠成为具有一定功能构象的蛋白质，在高尔基复合体中被包装进分泌小泡，转移至细胞膜，再分泌到细胞外。 （四）靶向