热休克蛋白与免疫.doc

热休克蛋白与免疫 (Heat Shock Protein and Immunity) 一、 概 述 热休克蛋白(heat shock protein, HSP)是一具有重要生理功能，参与免疫应答的高度保守的蛋白质分子大家族；根据其分子量的大小和同源程度，可将其分为HSP110、HSP90、HSP70、HSP60、小分子HSP等几个家族。生理、病理(如创伤和感染)及环境因素(如温度突然升高)等都可诱导一切细胞包括原核细胞和真核细胞产生HSP，故又称应激蛋白(stress protein，SP)。HSP的生物学功能广泛，不仅表现在应激条件下维持细胞必需的蛋白质空间构象，保护细胞生命活动，以确保细胞生存，而且在蛋白质折叠、跨膜运输、转位、细胞骨架及核骨架稳定等基本功能方面发挥重要作用，以调节这些蛋白质的活性和功能，而自身又不参与大分子蛋白质的组成，故HSP又称“分子伴侣”(molecular chaperon)。 最先发现HSP的是Ritossa(1962年)，他观察到正常果蝇暴露高温导致休克后，其唾液腺染色体变得疏松膨胀，对此现象的的原因他未能作深入的研究。12年后，Tissieres等(1974年)证实增高温度使果蝇染色体蓬松是由于热休克激发染色体内基因转录合成特异蛋白质引起的，遂将该蛋白称为热休克蛋白(HSP)。自1982年在冷泉港召开了第一次热应激蛋白国际会议，世界上各国对HSP的研究蓬勃发展起来了。Nover(1984年)与Soger等(1987年)先后阐明编码这种蛋白质的序列、基因结构及位点，如编码HSP70的基因在人类MHC基因位点图上介于补体成分与肿瘤坏死因子(TNF)之间，在大鼠中则靠近MHC-Ⅲ类抗原基因，在小鼠中，HSP84基因与MHC连锁。 除了温度的刺激作用以外，发现各种有害的理化因素，如氧化剂、重金属、乙醇或代谢抑制物等亦可促使HSP的合成增加。在机体遭遇组织损伤、病原体感染、炎症或遇有热原性的某些细胞因子(IL-1、IL-2、TNF、IFN)的刺激，皆会伤害细胞，使其蛋白质构型发生改变及功能消退，从而引起细胞的应激反应，编码合成HSP，以保护细胞和对抗有害因子。Ames等(1986年)或Filds等(1986年)分别用小剂量H2O2预先处理能高表达HSP的细胞内感染的鼠伤寒沙门氏菌，使其应激合成HSP，结果能耐受致死量H2O2或高热度攻击而不死；另一方面用同量的H2O2预先处理缺乏HSP基因表达的感染该菌的变异株，随后用高剂量的H2O2或热攻击，结果病原体和感染细胞皆被灭活，此因缺乏产生HSP或SP之故。Srivastava(1996年)从甲基胆蒽诱发的小鼠纤维瘤细胞上分离获取了HSP70，并证实可作为一种肿瘤转移性抗原诱发宿主的抗肿瘤免疫反应。Tamura等(1993年)也以H-ras转化的小鼠纤维肉瘤细胞W31上证实其表达HSP70，并发现一种CD8-CD4-双阴性T细胞介导了HSP70诱发的抗肿瘤免疫反应，这种CD8-CD4-双阴性T细胞后来被证实为γδT细胞。近年来证实HSP及其相关复合物是γδT细胞能识别的配体。 特别是近十几年来，发现某些HSP具有分子伴侣的作用后，使HSP的研究工作产生了一次飞跃，因而成为目前生命科学的热点课题，HSP广泛分布于生物界，在动物、植物、微生物及人类中普遍发现了HSP，其功能也是多种多样的。 二、 HSP的分类 (一) HSP分类的依据 HSP按其同源程度及分子量大小可分为：HSP110家族，HSP90家族，HSP70家族，HSP60家族、小分子HSP家族及泛素(ubiquitin,Ub,是广泛分布于细胞浆及细胞核中的小分子蛋白，有结合DNA的功能)家族。分族的方法是先将放射性核素标记的各种必要氨基酸加于拟检测的细胞群中进行温育，加热或应激处理，然后作SDS凝胶电泳分离，以放射自显影进行检测鉴定，根据生成的蛋白质的分子量，以千道尔顿(kD)单位对HSP命名，如HSP60，即此种HSP的相对分子量为60kD。由于不同细胞产生的各族HSP及其成员间常有40%~70%以上的序列同源或类似，故必要时需做Western blot进一步鉴定。 (二) HSP家族及其成员 应用上述的方法，可以将HSP分为不同的家族及成员，具体见表1131。 表1131HSP的家族、成员及其主要功能 [HJ*8] 家族主要成员主要生理功能主要免疫功能 HSP90HSP90 HSP87HSP84HSP83阻止类固醇受体结合至DNA，酪氨酸激酶磷酸化肿瘤防护及自身免疫性 HSP70gRP80 gRP78PBP72/74 BiPHSP70HSC70蛋白质折叠、去折叠、转运、多聚复合体装配Ig装配，MHC