探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化o.doc

探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 注:本文已获绍兴市市级论文一等奖,本实验探究过程已摄录,制成光盘,由人教社随新教材向全国发行. 浙江省绍兴一中 沈初见 邮编312000 联系0575-5338213 scjfjz@ 论文提要 本文通过教学参考的形式，结合探究过程，将人民教育出版社2004年版高中生物新教材中“探究培养液中酵母菌种群数量动态变化”这一实验预做情况展示出来，以便于有关师生在实际教学、学习中有所帮助。 关键词 培养液 酵母菌 种群动态 血球计数板 种群“S”增长模型 生长因素 今年3月至6月，人民教育出版社将2004年版高中生物新教材中8个实验的预做和摄像工作放在绍兴一中，我有幸承担了其一“探究培养液中酵母菌种群数量动态变化”这一实验。通过实验预做，对这一实验有了亲身的探究经历。现将实验中涉及到的有关问题及解决方案以教学参考的形式展示出来，与同行共商讨。 1 教学建议 探究培养液中酵母菌种群数量动态变化，尝试用实验数据拟合种群“S”增长模型来解释酵母菌的数量动态变化规律，对学生来讲是一全新内容，而且在探究过程中又涉及多项实验操作技能，如酵母菌的培养和显微镜下观察酵母菌的形态和计数等等。因此在开展探究活动前，要做好充分的准备。 1.1 培养基的配制：培养基是酵母菌生存、生长和繁殖的场所，配制培养基是本次探究活动顺利进行的基础，因此在探究前教师应先配制好用于增殖培养的液体培养基。本次实验选用无菌马铃薯培养液，原因不仅在于与肉汤培养液、豆芽培养液、牛肉膏培养基、酵母膏培养基等相比，马铃薯培养液培养效果最好，而且在各地一年四季均可买到，价格低廉。 1.2 酵母菌种的制备：酵母菌的种类很多，实验用的菌种来源也很多。比较简单的方法是用商店所售用于发面和做酒酿的高活性干酵母做为酵母菌种。 1.3 酵母菌的培养：酵母菌增殖的最适宜的温度在 28～ 30 ℃之间，pH在4.5～5之间，在有氧环境中酵母菌主要以出芽生殖方式进行增殖。大约每1．5～2h能芽殖一代，由此可推算出其增殖速度非常快。由于学生开展探究活动的时间受到多方面的限制，老师可调控温度来调节酵母菌的增殖速度，但在整个培养过程中，温度应保持一致。 1.4 酵母菌的计数：准确测定培养液中酵母菌的数量，是分析数量动态变化的关键。我们一般常采用在显微镜下观察并用血球计数板计数。老师应在探究前告诉学生计数板的使用方法，可如下说明：血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器，它的规格有两种，一种叫16× 25型，另一种叫25× 16型。我们以16× 25型来讲解血球计数板的使用方法。在血球计数板的中央有两个平面台，每个平面台各有一个含9个大格的方格网， 中央大格为计数室。将计数室放大，可见它含 16中格，一般取四角：1、4、13、16中格计数。将每一中格放大，可见25个小格。计数时，遇压线细菌，一般只计此中格的上方及右方线上的细胞。最后请学生推导出1毫升培养液中酵母菌细胞的计算公式 酵母细胞个数／1mL=所数100个小方格中细胞总数 × 400 × 10 4×稀释倍数/所数的小方格数100 推导说明如下：如刚才所示，每个血球计数板的计数室中， 有16个中方格，每1中方格中有25个小方格，整个计数室内有16×25=400小方格，所以，公式中要乘上400。每1个小方格边长为0.05mm，加上盖玻片后的空间深度为0.1mm, 则每1个小方格的容积为 0.05×0.05×0.1=0.00025(mm3 )，400个小方格总容积为 400×0.000 25=0.1(mm3).(1mL=1000mm3 )，因取样液为1 mL，所以，1万个0.1(mm3)才等于1 mL，这就是上式中10000的来历。计数一般取1、4、13、16中格计数，共100小方格中细胞总数。 若原样液中含细胞数较多，不利于准确计数，需要加入成倍的无菌水稀释，所以，公式中要乘上样液的稀释倍数。 　3.计算公式 　　(1)16格×25格的血球计数板计算公式: 　　酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×10四次方×稀释倍数 　　(2)25格x16格的血球计数板计算公式: 　　酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×10四次方×稀释倍数 3.3 实验操作 （l）无菌马铃薯培养液配制 材料：用天平称取 马铃薯（去皮）200g，葡萄糖20g，大烧杯量取1000 mL水。 配制方法如下：将去皮马铃薯，切成约2cm2的小块，放入盛有1000 mL水的水浴锅（能盛1000 mL水的锅即可，若用烧杯，应注意杯底受热是否均匀）煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底。30min后，用双层纱布过滤，过滤时用玻棒引流，取其