微生物细胞的破碎课件.pptVIP

任何破壁方法都有局限性和不足，应根据破壁目的、产物的类型和位置，选用合适的方法，达到选择性地分步释放目标产物的要求。 其一般原则为: 若提取的产物在细胞质内，需用机械破碎法。 若在细胞膜附近则可用较温和的非机械法。 若提取的产物与细胞膜或壁相结合时，可采用机械法和化学法相结合的方法，以促进产物溶解度的提高或缓和操作条件，但保持产物的释放率不变。 总结 选择破碎方法要考虑的因素： 细胞的数量，产物对破碎条件(温度、化学试剂、酶等)的敏感性，破碎程度及破碎速度，希望尽可能采用最温和的方法。 具有大规模应用潜力的生化产品还要选择适合于放大的破碎技术。 ① 多种破碎方法相结合。即机械方法与非机械方法的结合等，如用细胞壁溶解酶预处理面包酵母，然后高压匀浆，在95MPa压力下匀浆4次，总破碎率可接近100% ,而单独高压匀浆法破碎率只有32% ② 与下游过程相结合。必须从后分离过程的整体来考虑破碎操作，即破碎过程要易于细胞碎片的除净; ③ 与上游过程相结合。细胞的培养过程及其环境条件对细胞的结构及破碎难易有很大影响。 ④ 用基因工程的方法对菌种进行改造。如引入溶解酶的基因讯息，以代替机械破碎法也是非常重要的课题。 为解决破碎过程中敏感性物质的失活，杂蛋白太多以及碎片的去除问题，细胞破碎技术研究还应注意以下问题: 除研究破碎细胞的方法外，还应