《第八章分子生物学研究方法2.pptVIP

第四节 分子杂交技术 片段扩增倍数 （二）重组DNA的转化 1、转化 指以细菌质粒为载体，将外源基因导入受体细胞的过程。转化时，细菌必须经过适当的处理使之处于感受态－即容易接受外源DNA的状态，然后利用短暂热休克使DNA导入细菌宿主中。 此外还可用电穿孔法转化细菌，它的优点是操作简便、转化效率高、适用于任何菌株。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. （1）将快速生长中的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀（形成原生质球）。 步骤： （2）与转化混合物中的外源DNA形成粘附在细胞表面的复合物。 （3）立即将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激，复合物便会被细胞所吸收。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. （5）涂布于选择性培养基中分离转化子。 （4）在全培养基中生长一段时间使转化基因实现表达、细胞活性恢复 Evaluation only. Created w