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转基因水稻技术解密:原理清晰操作严谨
光照培养室,转基因水稻幼苗在白炽灯模拟的日照环境下生长
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水稻实验田刚收获的黄金大米本报记者王文佳 文/图
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近期,关于转基因食品的新闻层出不穷。61名院士联名上书请求尽快推进转基因水稻产业化;上千吨转基因菜籽油流入国储库风波乍起;崔永元称年内计划再赴美国拍摄转基因纪录片;国产非转基因大豆种植区九成豆企亏损停产;张掖一纸禁令喊停种植转基因作物。转基因食品犹如待嫁新娘,或许是由于打扮得与众不同,大家都在猜测她盖头下的模样。转基因实验究竟如何操作?转基因工程的原理是什么?我国目前的转基因水稻技术达到什么程度?记者走进华中农业大学转基因水稻研发团队,一探究竟。
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华农生科的福利粮
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在华中农业大学,林拥军有一块20亩的实验田,栽有几十种转基因水稻。时至立冬,田里还有一部分未收割。几名项目组的研究生正在做着收割、分装、编号、留种、移栽、稻蔸移栽温室等后期工作。再过几天,这批水稻的一部分将被移到海南,度过下一茬生长期,直到明年5月回归华农。
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两个学生把不同编号、不同性状的稻穗装进不同网袋中,捆扎好放在空地上,作为明年重要的实验材料。另外两人将部分性状稳定的水稻割下茎叶,剩下的稻蔸移栽到小盆中。这些稻蔸将在温室中过冬,同时完成它们中间实验的使命。虽然水稻是一种自花授粉植物,但是为了防止小概率花粉飘移,转基因水稻实验田一边筑起三米高的墙,一边修缮了近60亩的隔离池塘,内部采用循环水利系统,以保证封闭的实验环境。
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1999年,水稻团队研发出的“华恢1号”和“Bt汕优63”两种转基因水稻也产自这片实验田。他还记得第一批大米收获后科研人员迫不及待品尝的场景:当时就做了一大锅,虽然因是老品种口感不好,但大家还是吃得很香。那一年,距离农业部给两种水稻颁发“安全证书”还有10年,可是实验富余的大米已进入了林拥军家的餐桌。“我对自己的产品最清楚,很安全。”
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吃华农转基因水稻的,不只是林拥军。两种转基因水稻2009年获颁农业部安全证书,开始生产性试验后,被作为福利发给生科院的老师们。从那一年开始,林拥军家几乎顿顿都吃这种大米。算下来,他已吃了14年。
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林拥军的放心,基于对转基因的认识。他说,现在争议最大的是转Bt基因水稻,从作用机理上来说,Bt蛋白是苏云金芽胞杆菌产生的一种伴胞晶体,本身没有毒性,是一种原毒素。当鳞翅目昆虫取食这种蛋白后,其在昆虫肠道内会被一种碱性蛋白酶切割,降解为对昆虫具毒性的活性肽,这才是“毒蛋白”。它能够和昆虫肠道细胞外膜上的特异性受体结合,在外膜表面穿孔,破坏细胞渗透平衡,最终导致昆虫厌食,继而死亡。对水稻造成最大经济损失的3种害虫:二化螟、三化螟和稻纵卷叶螟都是鳞翅目昆虫,处于Bt蛋白的杀虫谱中。
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有人担忧“虫吃了要死,人吃了怎样”。林拥军解释,人类和昆虫是完全不同的物种。番茄碱、辣椒素都能杀虫,但并不妨碍番茄和辣椒成为人们喜爱的食物。又有人提出转入的基因可能进入人体造成危害,他又澄清说,人每天都要食入数以亿计的外源基因,如果基因都能进入人体,那人现在都变成什么样了?林拥军说,人类和绝大多数动物既没有可以激活原毒素的蛋白酶,也不存在能和Bt蛋白特异性结合的受体。更何况鳞翅目昆虫体内是碱性环境,而人体消化道呈强酸状态,这种蛋白最多只能存活15秒。
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原理清晰的转基因
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1995年,华农水稻团队启动转基因抗虫水稻培育工作,此前国内已有学者从事相关研究,国外也成功研制出了抗除草剂水稻。原理清晰,实验过程却是在一次次的尝试和碰壁中朝前推进。即使一个很小的实验或步骤,如酶切、构建载体、配制培养基,由于数量庞大,也需要很长时间。更何况,原理说起来简单,但操作起来却需要十分严谨和繁琐的步骤。
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实验第一个需要攻克的步骤是要选择合适的目的基因。自1981年第一个杀虫晶体蛋白基因被克隆以来,已有近300个不同的Bt杀虫晶体蛋白基因被克隆,并被广泛应用。从中选择出对靶标害虫杀虫效果好的,就需要大量前期选择。
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具体到转基因过程上,实验室面对当时籼稻难以转化的瓶颈,采用了不受受体植物范围的限制基因枪介导转化技术。经过林拥军改良的适用于籼稻的培养基和培养方法,也保障了研究进展的相对顺利。
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林拥军的团队共30多名师生,主要工作就是不断重复上述实验,筛选出基因成功转移的细胞,通过细胞和组织培养技术,分化成苗子,种到实验田中,然后在水稻抽穗期用鳞翅目昆虫做实验。用于后期安全评价的材料,则是稳定的第八代遗传材料。
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“当时,限于技术能力,基因转入的位点是随机的。首先从一两百个独立转化体中选择抗虫性状最好的。再通过分子生物学手段分析它们各自外源基因插在哪个位置,会不会导致内源基因的失活,会不会产生新的基因。”林拥军说,“随着2002年水稻基因组测序完成和随后功能基因组研究的深入
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