【卓越学案】2017高考生物总复习 第11单元 第37讲 基因工程及其安全性学案.docVIP

第37讲 基因工程及其安全性 [考纲点击]　1.基因工程的诞生(Ⅰ)　2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)　3.基因工程的应用(Ⅱ)　4.蛋白质工程(Ⅰ) 5．转基因生物的安全性(Ⅰ)　6.生物武器对人类的威胁(Ⅰ) 一、基因工程的基本工具 1．限制性核酸内切酶 (1)来源：主要从原核生物中分离纯化而来。 (2)作用：识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 (3)结果：产生黏性末端或平末端。 2．DNA连接酶 (1)作用：将限制酶切割下来的DNA片段拼接成DNA分子。 (2)类型 常用类型 E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 来源 大肠杆菌 T4噬菌体 功能 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端 结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 3.载体 (1)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 (2)质粒特点 二、基因工程的操作程序 — —组成 —方法 　 三、基因工程的应用 技术名称 应用 植物基 因工程 培育抗虫转基因植物、抗病转基因植物和抗逆转基因植物，利用转基因技术改良植物的品质 动物基 因工程 提高动物生长速度，改善畜产品的品质，用转基因动物生产药物，用转基因动物作器官移植的供体 基因治疗 把正常基因导入病人体内，使其表达产物发挥功能，从而治疗疾病，分为体内基因治疗和体外基因治疗 四、蛋白质工程 1．目标：根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计。 2．操作手段：基因修饰或基因合成。 3．设计流程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。 五、转基因生物的安全性 1．转基因成果 (1)工程菌——DNA重组微生物。 (2)基因制药。 (3)转基因动物——生物反应器。 (4)转基因农作物。 2．安全性问题 (1)食物安全：滞后效应(产生毒性蛋白质)、新的过敏原、营养成分改变。 (2)生物安全：生物入侵，破坏生物多样性。 (3)环境安全：破坏生态系统的稳定性和人类生活环境。 3．理性看待转基因技术 (1)需要正确的社会舆论导向，趋利避害，不能因噎废食。 (2)制定符合本国利益的政策和法规，最大程度地保证转基因技术和产品的安全性。 六、禁止生物武器 1．种类：病菌、病毒、生化毒剂及经过基因重组的致病菌。 2．我国政府态度：任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。 1．基因工程的基本工具 (1)两种工具酶：限制酶、DNA连接酶。 (2)一种运输工具：载体。 2．载体的种类和条件 (1)常见三种类型：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。 (2)四条件：能够自我复制、有多个限制酶切割位点、具有标记基因、对受体细胞无伤害。 3．基因工程的基本操作程序的四个主要步骤 ①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。 4．目的基因的获取与检测 (1)三种获取方法：基因文库直接获得、PCR扩增、人工合成。 (2)四种检测方法：DNA分子杂交、DNA—mRNA分子杂交、抗原—抗体杂交、个体生物学水平的抗性检测。 考法一　基因工程的操作工具 1．限制性核酸内切酶 (1)识别序列的特点：呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线。如图，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。如　以中心线为轴，两侧碱基互补对称；以为轴，两侧碱基互补对称。 (2)切割后产生末端的种类——黏性末端和平末端。 ①黏性末端：是限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时形成的(错位切)，如下图所示： ②平末端：是限制酶在识别序列的中轴线切开时形成的(平切)，如下图所示： 2．限制酶与DNA连接酶的关系 (1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。 (2)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 (3)DNA连接酶起作用时，不需要模板。 3.载体具备的条件 条件 目的 稳定并能复制 目的基因稳定存在且数量可扩大 有一个至多个限制酶切割位点 可携带多个或多种外源基因 具有特殊的标记基因 便于重组DNA的鉴定和选择 　确定限制酶的种类 (1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类 ①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。 ②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ。 ③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。 (2)根据质粒的特点确定限制酶的种类 ①