植物凝集素的防卫功能及其研究进展.doc

- 33 - 世界农业World Agricult ure 200012(总250) 山西农业大学农业生物工程中心 高燕会李润植毛雪李彩霞 植物凝集素的防卫功能及其研究进展 植物凝集素(lectin) 是一类具有至少一个 非催化结构域, 并能可逆地结合特异单糖或寡 聚糖的植物蛋白。自从Stillmark (1888) 首次 在蓖麻种子抽提物中发现一种凝血因子和 Sumner 第一次分离纯化到植物凝集素———伴 刀豆球蛋白A (ConA) 以来, 人们已经从豆 科、茄科、大戟科、禾本科、百合科和石蒜科 等众多植物类群中分离鉴定出几百种这类蛋白 质, 并对它们的性质、分子结构及功能作了大 量的研究, 许多工作已深入到基因水平。同类 凝集素的氨基酸序列同源性极高, 这种保守性 暗示着凝集素在生物进化过程中以及植物生命 过程中起着重要作用。例如, 凝集素作为贮藏 蛋白用来包装和运输物质, 作为植物细胞的促 有丝分裂因子, 在多酶体系中结合糖蛋白, 参 与细胞壁的延伸, 细胞间的识别、生长调节以 及碳水化合物的运输等。尤其是凝集素防卫功 能的发现及论证, 引起了人们极大的关注, 一 些植物凝集素的基因克隆已应用于植物抗病虫 基因工程。 一、植物凝集素的防卫功能 Chrispeels 和Raikhel (1991) 曾客观地评 价了植物凝集素家族和许多几丁结合蛋白质的 防卫作用。近年来, 越来越多的分子生物学、 生物化学、细胞学、生理学及进化学上的证据 表明, 大多数植物凝集素在植物生长发育的各 个阶段, 以不同的方式保护植物免受病虫的侵 害( Etzler ,1995) 。 11 植物凝集素的抗虫作用菜豆凝集素 ( PHA) 是第一个被描述的具有抗虫性的植物 凝集素。有趣的是, PHA 对豆象幼虫具有毒 性的结论是基于一个错误的实验结果, 后来研 究发现这种防卫作用是由于含有α- 淀粉酶抑 制剂的缘故(Huesing 等, 1991) 。如今许多实 验表明, 来源于麦胚、马铃薯块茎、核桃、沙 棘、水稻和刺荨麻的凝集素对豌豆象甲幼虫和 豇豆象甲幼虫的生长有抑制作用。麦胚凝集素 和紫羊蹄甲种子凝集素在相当低的含量水平就 使初孵玉米螟幼虫致死(Czapla Lang , 1990) 。雪花莲凝集素( Gal ant hus ni v al is ag2 glutinin ,GNA) 等对咀嚼式昆虫和刺吸式昆虫 都有致死作用。黄大瞭等(1997) 报道来源于掌 叶半夏和半夏的凝集素对麦长管蚜、禾缢管 蚜、棉蚜和桃蚜等有致死活性。我们利用全纯 营养液饲养蚜虫技术明确鉴定了棉花凝集素 ( GHA) 、蓖麻凝集素(ACA) 、天南星凝集素 (AMA) 和伴刀豆凝集素(ConA) 对棉蚜和麦长 管蚜的抗生作用(毛雪等, 1999) , 尽管所测凝 集素半致死浓度有差异。 植物凝集素的毒性可能与它们在昆虫肠 腔部位与糖蛋白特异性结合有关, 其确切的 作用机理尚不十分清楚。一般认为, 植物凝 集素被昆虫摄入体内后, 可与肠道围膜上的 糖蛋白相结合, 降低了膜的通透性, 影响营 养物质的正常吸收; 与此同时, 凝集素可能 - 34 - 200012(总250) 世界农业World Agricult ure 在昆虫消化道内诱发病灶, 促进消化道内细 菌的繁殖, 使昆虫得病或引起昆虫拒食、生长 停滞甚至死亡。 21 植物凝集素对病原菌的抗生作用植 物凝集素作为微生物与植物的共生介质, 可 防止植生病菌对植物的危害。已有实验证 明, 植物凝集素能结合真菌细胞、抑制孢子 萌发和菌丝体生长。Mishkid 等( 1982) 研究 发现, 植物凝集素常积累于病原菌易侵染的 部位, 预示着凝集素可能参与对病原菌的防 御。刘士庄等( 1996) 报道, 棉花种子中凝集 素含量与棉花抗枯萎病能力呈正相关, 分离 纯化的棉花凝集素能明显凝集枯萎病菌分生 孢子, 并抑制其萌发。Peumans 和Van Damme (1995) 进行的体外研究表明, 麦胚凝 集素(WGA) 抑制绿色木霉的孢子萌发和菌丝 生长, 狭叶荨麻凝集素抑制灰葡萄孢、钩状 木霉和布拉克霉的生长。植物凝集素对真菌 的抗生效应可能与它特异结合暴露于真菌细 胞壁表面的糖复合物并导致真菌细胞壁及菌 体结构形态改变有关。 植物凝集素亦具有抗细菌活性。Sequeira 和Graham (1977) 曾报道, 马铃薯凝集素在细 菌胞壁中能阻止青枯假单胞菌无毒菌株的入 侵。Broekaet 和Peumans (1986) 体外实验表 明, 刺苹果种子凝集素可使细菌运动能力丧 失, 萌动种子释放凝集素可阻止幼根受到强 致病细菌的侵害。Ayouba 等(1994) 研究指 出, 几种豆科植物种子凝集素可与细菌细胞 壁肽聚体(胞