液质连用实验.doc

研究生综合实验报告 姓名： 专业：环境科学与工程 学号： 日期：年月日 LC-MS定性分析水中PFOA 实验目的： 1）了解lC-MS各部件的功能，掌握其原理和应用。 2）掌握样品预处理的方法，学习SPE萃取原理及LC-MS分析的一般实验方法。 3）学会使用LC-MS对未知物进行定性分析。 方法原理： PFOA代表全氟辛酸及其含铵的主盐，或称为“C8”，分子式如下： PFOA既有亲油的性质，又有亲水的特性。其中的F具有亲油性质，而右侧的-COOH具有亲水的性质，为一种人工合成的化学品，通常是用于生产高效能氟聚合物时所不可或缺的加工助剂,当PFOA 分解后会在环境或人体中释放出来，对环境和人体造成毒性危害。一般情况下在水体中都能检测到PFOA的存在。在实验过程中应先进行样品的浓缩净化，选用SPE固相萃取技术。 SPE固相萃取的原理：SPE技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化使液体样品溶液通过吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲去杂质，然后用少量溶剂迅速洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。也可选择性吸附干扰杂质，而让被测物质流出；或同时吸附杂质和被测物质，再使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。 色谱的优势在于分离，为的分离提供了最有效的选择，但其难以得到物质的结构信息，主要依靠与标准物对比来判断未知物，对无紫外吸收化合物的检测还要通过其它途径进行分析。质谱能够提供物质的结构信息，用样量也非常少，但其分析的样品需要进行纯化，具有一定的纯度之后才可以直接进行分析 1.水样的采集与保存 2. 水样过滤 3.水样SPE固相萃取净化与浓缩：1）活化----除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。 先加入4mL0.1%的氨水甲醇，控制流速，在柱未流空前加入4mL甲醇，按照同样的 方法，再加入4mL超纯水，使萃取柱充分活化 2）上样----加入50mL水样，按照1滴/s的流速流过萃取柱，使待 测组分保留在萃取柱上 3）清洗----最大程度除去干扰物。以C18柱（左图）为例，当pHpKa 时， 杂质以离子形式存在，当 pHpKa 时，杂质以分子形式存在，可以随清洗液流出，而在酸性条件下，固定相带正电荷（右图），可以与-COOH作用，不会随洗脱液而流失 从 而达到净化的目的。故应在酸性条件且 pHpKa-1的情况下进行萃取柱的清洗，因此，本步骤用4mL甲酸进行清洗，注意不要使柱子走空。 4）SPE柱离心干燥，去除水分。 5）目标物洗脱---- 先加入4mL甲醇，再加入4mL0.1%的氨水甲醇，注意 收集流出的液体。 6）浓缩----将样品浓缩到1mL 4.进样：用进样器把处理后的样品注入LC进样口中。经过分析得到质谱图。 注意事项： 在实际操作过程中应注意回收率的问题，每步操作尽量不要使萃取柱走空。 不同的物质应选择不同的填料，提高样品回收率。 洗脱液应根据实际情况，选择恰当的洗脱强度。 注意调节流动相的pH，从而将杂志去除，所需样品保留在柱子上。 流速的控制。在操作过程中控制流速，若流速过快，可能会使样品还为结合到萃取柱上就随流动相流出，造成样品损失。 柱容量的控制一般选择在1%--5%之间。 结果分析： 4