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- 2017-01-01 发布于湖北
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第四章细胞破碎和分离技术精选
能溶解膜结构中的脂蛋白,使细胞通透性增加。 1、细胞的处理量 2、细胞壁的强度和结构 3、目标产物对破碎条件的敏感性 4、破碎程度 三、选择破碎方法的依据 适宜的操作条件应有高的产物释放率,低的能耗和便于后步提取这三方面进行权衡 1、简要说明常用的细胞破碎方法、原理及特点? 作业与思考题 细胞碎片去除和产品纯化同步的方法 四、从发酵液直接分离产物 细胞破碎 目标产物 细胞碎片很小,很难用过滤法除去。 (一)双水相分离技术 1、双水相体系简介 明胶 琼脂(或可溶性淀粉) 1896年,荷兰微生物学家Beijerinck发现 传统的双水相体系是指高聚物双水相体系 憎水程度有所差异 (1)聚乙二醇(PEG)/葡聚糖; (2)聚乙二醇(PEG)/盐相(硫酸盐或者磷酸盐) 2、常用双水相体系 聚乙二醇(PEG) 无毒、无刺激性,具有良好的水溶性 3、双水相体系分离细胞碎片 目标产物 细胞或细胞碎片 优点:设备简单,容易放大 缺点:规模放大时,成本增加 用PEG1500/NaH2PO4体系从Trichoderma koningii发酵液中分离纯化β-木糖苷酶,该酶主要分配在下相,下相酶活回收率96.3%,纯化倍数33。 (二)膨胀床分离技术 1、膨胀床的定义 (1)固定床:又称填充床,填充的固体物通常呈颗粒状,堆积成一定高度的床层。床层静止不动,流体通过床层进行分离纯化。
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