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实验二十六 微量元素测定 甲基麝香草酚蓝比色法测定血清镁 一、临床意义 减低：1.消化道丢失，如吸收不良、慢性腹泻 2.尿路丢失，如慢性肾炎多尿期 3.内分泌疾病，如甲亢、糖尿病酸中毒 增高：1.服用治疗剂（硫酸镁）过量 2.尿毒症、急慢性肾衰 3.内分泌疾病：甲减 4.多发性骨髓瘤、SLE 二、实验原理： 甲基麝香草酚蓝（MTB）是一种金属络合剂，在碱性条件下，样品中的镁离子与二甲苯胺蓝生成 有色化合物。在540nm波长下测量其吸光度值。通过计算求出Mg的含量 三、操作步骤 空白 标准 测定 蒸馏水 20μl 标准液 20μl 血清 20μl 工作液 2ml 2ml 2ml 在室温放置5分钟，540nm用空白管调零722 分光光度计测定。 镁浓度=A样品/A标准×C标准 【参考值】0.8-1.0mmol/L 亚铁嗪比色法测定血清铁 一、临床意义 1.降低: （1）体内总铁不足：如营养不良、缺铁性贫血 （2）铁丢失增加：慢性长期失血 （3）铁的需要量增加：妊娠及婴幼儿生长期 2.增高： 含铁血黄素沉着症、溶血性贫血、再障、铁粒幼红细胞性贫血。 二、实验原理 存在于血清中的铁均已三价铁的形式与转铁蛋白结合，它在酸性介质中能从转铁蛋白复合物中解离出来，被还原成二价铁，再与亚铁嗪直接作用生成紫红色复合物。在540nm处有吸收峰，与同样处理的铁标准液相比较，即可求出血清铁含量。 三、实验操作： 空白 标准 测定 蒸馏水 0.5ml 标准液 0.5ml 血清 0.5ml 试剂 1.5ml 1.5ml 1.5ml  混匀水浴10分钟。540nm用水调零测定A1空白、A1标准、A1测定。然后分别加入R3显色剂20μl ，测定A2空白、A2标准、A2测定。 四、结果计算 △A空白=A2空白-A1空白 △A标准=A2标准-A1标准 △A测定=A2测定-A1测定 铁浓度= 【参考值】男：14.3-26.9μl mol/L 女：10.7-25.1μl mol/L 血清铜的测定 一、临床意义 1.降低: 可见于某些缺铁性贫血、烧伤病人以及各种原因引起的低蛋白血症。 2.增高： 见于甲亢、结核、风湿、巨幼红细胞性贫血、结缔组织病、再障等。 二、实验原理 血清铜在醋酸－醋酸钠缓冲液中从复合物中解离出来，并与显色剂发生反应生成紫红色化合物。在560nm的波长下，测量其吸光度值，然后通过计算求出血清铜的浓度。 三、实验操作： 空白 标准 测定 蒸馏水 0.3ml 标准液 0.3ml 血清 0.3ml 工作液 2ml 2ml 2ml 显色剂 0.5ml 0.5ml 0.5ml 混匀37℃，水浴5min、560nm处用722测量各管的吸光度值 铜浓度=A样品/A标准×C标准 【参考值】 12-24μ mol/L 血清锌的测定 一、临床意义 1.降低: 常见于酒精中毒性肝硬化、原发性肝癌、慢性活动型肝炎、胃肠吸收障碍、营养不良以及其他慢性消耗性疾病。儿童缺锌可出现厌食、嗜睡、生长缓慢等现象 2.增高： 主要见于工业污染引起的急性锌中毒等 二、实验原理 样品中的锌离子与锌试剂反应，形成蓝色化合物，显色剂本身呈红色，在低含量水平范围呈紫色，样品中的Fe3＋、Cu2+通过除干扰剂隐蔽起来，这样在620或630nm波长测定吸光度值，然后计算锌的含量。 三、实验操作 空白 标准 测定 标准液 0.2ml 血清 0.2ml 工作液