微生物检验实验一细菌的基本形态.pptVIP

病原微生物学实验指导 实验教学中心 成 静 实验一 细菌的基本形态与特殊结构 实验目的： 1、掌握革兰染色法和细菌的基本形态 2、熟悉细菌涂片的制备 3、掌握细菌特殊结构观察 4、掌握显微镜油镜的使用和保护 实验内容 1、临床微生物学实验室规则 2、实验室意外的紧急处理办法 3、实验时的注意事项 4、细菌形态学检查： 革兰染色和细菌基本形态观察 特殊结构观察 临床微生物学实验室规则 1、进入实验室必须穿白大衣，离室时脱下反折，必要时戴口罩操作。 2、不必要物品勿带入实验室，必要的物品应放在指定区域。 3、实验室内禁止饮食、抽烟，不得高声谈笑或随意走动。 4、用过的有菌器材必须放在指定位置，小心处理传染材料、培养物和污染物。 5、避免任何有菌材料的溅出，如不慎污染工作台、人、衣服、地面等，应及时报告老师并处理。 6、实验结束后物归原处，用消毒液浸泡、洗手，打扫卫生的同学清洁和消毒桌面、地面，并将实验器材送到准备室和消毒间，关闭水电门窗后离开实验室。 实验室意外的紧急处理办法 1、皮肤破损 2、烧伤 3、化学药品腐蚀伤 4、菌液误入口中 5、菌液流洒桌面 6、火警 实验时的注意事项 一、严格遵循实验指导 二、认真完成实验操作 三、充分利用参考资料 细菌形态学检查 革兰染色法和细菌的基本形态 器材和试剂： 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌 培养基：普通琼脂平板 试剂：革兰染液 其他：载玻片、生理盐水、酒精灯、火柴等 革兰染色法和细菌的基本形态 细菌涂片的制作 涂片 干燥 固定 革兰染色法 方法 1、初染:将结晶紫染液1-2滴加在制好的涂片上，染色1分钟，用细水冲洗，甩去积水。 2、媒染：加卢戈碘液1-2滴，染1分钟，用细水冲洗，甩去积水。 3、脱色：加95%酒精数滴，轻摇玻片数秒，使均匀脱色，至无紫色淌下，用细水冲洗，甩去积水。 4、复染：加稀释复红1-2滴染1分钟，用细水冲洗，甩去积水。用吸水纸吸干后，在涂片上滴加镜油，置油镜下检查。 革兰染色法 结果观察（油镜下观察，放大1000倍）： 1、细菌的基本形态及大小：球菌、杆菌、弧菌 2、细菌的排列方式：散在、葡萄状、链状、成双、四叠、八叠 3、细菌的染色性：阳性呈紫色、阴性呈红色 4、细菌的特殊结构：荚膜、芽孢，不能看到鞭毛。 革兰染色法 思考题： 1、原理 2、意义 3、注意事项 革兰染色法 思考题： 1、原理:因细菌壁的等电点,通透性等不同,导致着色和脱色的差异,从而产生了不同的着色结果. 2、意义:鉴定细菌,观察致病性,指导用药 3、注意事项: a涂片的厚薄, b固定的效果 c脱色的效果 特殊结构观察 芽孢：破伤风杆菌（革兰染色法） 荚膜：肺炎双球菌（革兰染色法） 鞭毛：变形杆菌（镀银染色法） 实验小结 1、实验报告要求 2、思考题写到实验报告里 * * 大肠杆菌 金葡菌 霍乱弧菌 链球菌 革兰阴性双球菌 破伤风芽孢 肺炎双球菌荚膜 变形杆菌周鞭毛—鞭毛染色法