湖工酶工程第三章要素.ppt

1. 萃取原理 利用酶或蛋白质等电解质与反胶团中表面活性剂分子亲水性头部所带荷电基团之间的静电作用以及反胶团的空间排阻作用来促使目标产物向反胶团中溶解。 2. 操作过程 微水相 反胶团 有机相 水相 （1）正萃取 （2）反萃取 3. 影响因素 （1）水相pH值。 （2）离子强度。 （3）表面活性剂和助表面活性剂。 （4）温度和相比。 （5）蛋白质的种类和浓度。 五、层析分离 又称色谱分离，利用溶液中不同的溶质组分与固定相之间相互作用的不同，使得不同的溶质组分随流动相通过固定相时的移动速度不同，从而使不同的溶质组分得以相互分离。 强疏水作用 反相层析 离子交换 离子交换层析 弱疏水作用 疏水层析 分配系数 分配层析 等电点 层析聚焦 吸附力 吸附层析 亲和力 亲和层析 分子量与形状 凝胶层析 分离依据 层析方法 分离依据 层析方法 表3-5 层析分离方法 梯度混合器 样品贮液器 层析柱 恒流泵 蛋白核酸检测仪 自动部分收集器 记录仪 　柱层析过程装置示意图 （一）凝胶层析 又称凝胶过滤层析、凝胶渗透层析、分子筛层析、分子排阻层析。以各种颗粒状的多孔凝胶作为固定相，利用溶质分子量的差异进行分离的层析分离法，称为凝胶层析。 凝胶颗粒 常用的凝胶介质：葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯