5第五章核酸化学题材.ppt

第 五 章   核 酸 主要内容 1.概述:核酸的概念和重要性 2.核酸的类别分布和组成 3.核酸的结构 4.核酸的性质 5.核酸的分离和纯化 6.核酸的分析和测定 7.核酸的生物学功能 8.基因重组和生物工程 第一节 概论 一、核酸研究简史 （一）核酸的发现 1868年瑞士青年科学家Miescher在外科绷带脓细胞分离得到细胞核，从中提取出一种含磷量很高的酸性化合物称为核素。 1889年Altmann发明了从酵母和动物组织中制备不含蛋白质的核酸的方法。首次提出了核酸的名称。 （二）核酸功能的发现 1944年,Avery的肺炎球菌转化现象证明了遗传的物质基础是核酸 （三）DNA双螺旋结构模型结构的建立 X-射线结晶学技术的进步导致1953年 Watson和Crick提出DNA双螺旋结构模型。1958年提出中心法则。 1966年Nirenberg破译了遗传密码 DNA双螺旋立体结构 （四）生物技术的兴起 七十年代前期DNA重组技术的建立的基础导致现代生物技术的兴起。 （五）人类基因组计划开辟了生命科学的新纪元 1990年人类基因组计划实施庞大的人类基因组计划，在经过各国科学家的多年努力，已取得巨大的成就。 人类基因组的全序列提前到2003、4、14完成。 生命科学已进入了后基因组时代，研究重心已从基因测序转移到基因的功能。 功能基因组学 蛋白质组学 结构基因组学 RNA组学 二 核酸的概念和重要性 (一)概念 核酸是由许多核苷酸单元按一定顺序连接组成的线性多聚体，是核蛋白的组分之一，呈酸性，最初从细胞核中发现，所以称核酸。核酸是所有生物遗传变异的物质基础。 (二)重要性 1.与生命活动关系密切，是重要的生命物质。生命的起源、生长、发育、衰老、死亡与之有关。 2.核酸研究是现代生命科学研究的核心。 第二节 核酸的类别、分布和组成 一、类别： 核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。 核糖核酸（RNA）分成三类： 1、信使RNA（mRNA） 2、转运RNA（tRNA） 3、核糖体RNA（rRNA） 还有些其他类型的RNA存在。 二、分布以及功能 1、DNA的分布： 核区（原核生物） 细胞核（真核生物） 细胞器（真核生物的线粒体、叶绿体） 质粒（原核、真核生物） 另外，病毒中含有DNA或RNA. 2、RNA的分布及功能 细胞质RNA——参与蛋白质的生物合成 1、信使RNA（mRNA）——提供模板 2、转移RNA（tRNA）——携带氨基酸 3、核糖体RNA（rRNA）——合成蛋白场所 细胞核RNA 如前体RNA，非迁移性RNA等 另外，线粒体，叶绿体以及病毒和亚病毒中也有RNA的存在。 三、组成 1.组成元素:C 、 H 、 O 、 N 、 P 2.组成单位:核苷酸 就像氨基酸是蛋白质的单体分子一样，核苷酸 — 一种核糖苷的磷酸酯 — 是核酸的单体分子。 （1）核酸中的糖 RNA为D-核糖，DNA为 D-2-脱氧核糖，二者都是β 型。差别：2 位羟基是否脱氧。 （2）碱基（bases） Pyrimidines Purines （3）核苷： 核苷(nucleoside)是核糖(ribose)与碱基生成的糖苷(glucoside)——糖的 C1′与 purine 的 N9 或 pyrimidine 的 N1 相连 核苷结构特点： 1、戊糖与碱基通过β-糖苷键相连，C—N糖苷键。 2、糖C1与嘧啶碱N1或嘌呤碱N9相连，碱基与糖环垂直。 3、根据核苷中所含戊糖的不同，分为核糖核苷（RNA中）和脱氧核糖核苷（DNA中）。 4、由于空间阻碍，N-苷键无法自由转动，故碱基的排布存在顺式结构和反式结构。自然界中多以反式存在。 5、由于碱基、核糖的修饰，以及核苷键的不同，存在稀有组分（或修饰成分）。 ? 如：假尿嘧啶核苷 （4）核苷酸 第三节 核酸的结构 表示方法 （1）线条式：竖线碳链、碱基、磷酸 （2）文字式： 5＇pＡpＣpＴpＴpＧpＡpＡpＣpＧ3＇DNA5＇pＡpＣpＵpＵpＧpＡpＡpＣpＧ3＇RNA 此式可进一步简化为： 5＇ＡＣＴＴＧＡＡＣＧ3＇5＇ＡＣＵＵＧＡＡＣＧ3＇ 1、DNA的一级结构 DNA的一级结构A、T、G、C通过3`，5`-磷酸二酯键连接，C’1—碱基，C’2——脱氧。 碱基：A、T、G、C 脱氧核糖 没有侧链 DNA的一级结构图示 2 、一级结构的测定 原理:末端终止法 化学法 DNA测序仪 （1）末端终止法： （2）化学法 硫酸二甲酯使G和A甲基化后，G的糖苷键更容易断裂，甲酸