09.07.24高三生物《dna的粗提取与鉴定》(课件)09.07.24高三生物《dna的粗提取与鉴定》(课件).pptVIP

（三）去除滤液中的杂质 　　为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理。 （三）去除滤液中的杂质 　　为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理。 讨论 　　此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？ （三）去除滤液中的杂质 　　答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质 　　为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理。 讨论 　　此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？ 方 案　 　　方案一：30mL滤液＋35gNaCl→同方向搅拌，DNA溶解→加入蒸馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶解液 方案二：30mL滤液＋嫩肉粉（木瓜蛋白酶）→静置10～15分钟→DNA滤液 方案三：30mL滤液→60～67℃处理→过滤获得DNA滤液 讨论 　　为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？ 湖南长郡卫星远程学校 2009年下学期 制作 03 　　构成生物体的遗传物质是什么？ 讨论１： 　　构成生物体的遗传物质是什么？ 　　怎样才能将细胞内的遗传物质分离出来？ 讨论2： 讨论１： 基础知识 0 溶解度 NaCl浓度 0.14mol/L 2mol/L 〖思考1〗DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点？ 在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低; 在0.14 mol/L时，DNA溶解度最小；当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA的溶解度又逐渐增大。 基础知识 0 溶解度 NaCl浓度 0.14mol/L 2mol/L 〖思考1〗DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点？ 基础知识 0 溶解度 NaCl浓度 0.14mol/L 2mol/L 〖思考2〗要使DNA溶解，需要使用什么浓度？要使DNA析出，又需要使用什么浓度？ 　　2mol/L浓度可使DNA溶解； 　　0.14mol/L浓度可使DNA析出。 基础知识 0 溶解度 NaCl浓度 0.14mol/L 2mol/L 〖思考2〗要使DNA溶解，需要使用什么浓度？要使DNA析出，又需要使用什么浓度？ 基础知识 　　〖思考3〗 酒精是一种常用有机溶剂，但DNA却不能溶于酒精（特别是95％冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。问：采用DNA不溶于酒精的原理，可以达到什么目的？ 将DNA和蛋白质进一步分离 基础知识 　　〖思考3〗 酒精是一种常用有机溶剂，但DNA却不能溶于酒精（特别是95％冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。问：采用DNA不溶于酒精的原理，可以达到什么目的？ DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ①蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响 ②大多数蛋白质不能忍受60－80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性 ③洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜，去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响 基础知识 〖思考4〗 提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应选用怎样的酶和怎样的温度值？ 〖思考4〗 提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应选用怎样的酶和怎样的温度值？ 基础知识 　　蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。温度值为60～80℃，因为该温度值蛋白质变性沉淀，而DNA不会变性。 DNA的鉴定 基础知识 DNA的鉴定 ①DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 基础知识 DNA的鉴定 ①DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 ②甲基绿（绿色） 基础知识 　　通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA，可以从细胞中提取DNA；再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来，达到提纯的目的；最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。 原理总结 （一）实验材料的选取 实验设计 不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。你认为教材提供的材料中哪些不适合提取DNA？ （一）实验材料的选取 实验设计 不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。你认为教材提供的材料中哪些不适合提取DNA？ 哺乳动物的血液和液体培养基中的 大肠杆菌。 （一）实验材料的选取 实验设计 　　从核DNA数目来看，猪38条，鸡78条，哺乳动物血0条，猕猴桃58条，洋葱16条，豌豆14条，菠菜12条，大肠杆菌1条。请选择动植物材料各一种。 （一）实验材料的选取 实验设计 鸡血、猕猴桃。 　　从核DNA数目来看，猪38条，鸡78条，哺乳