肿瘤相关基因__培训课件.pptVIP

* p16基因是一个新发现的基因，它如何参与肿瘤发生发展，以及与肿瘤的分期，分级相关性如何目前尚不清楚 * 1 A.Kmudson从这一事实，提出了“两次突变”学说 2 上述资料提示，正常细胞中存在着具有抑制某些肿瘤发生的某些基因或基因片段 * 这无疑成为抗瘤基因研究的一个重要里程碑 * 由于以上传统技术路线的局限性，目前极需考虑采用新的战略技术。 传统的研究技术路线—1 各实验室用于分离癌基因的技术路线大体上有以下几个方面： 1．癌细胞的基因组DNA，通过DNA转染后导入某些受体细胞。发生恶性转化后，组建转化细胞株的基因文库，从中分离出癌基因的克隆 具体分以下几个环节： 传统的研究技术路线—1环节之一： 癌细胞的材料来源，文献报道，多数直接癌的体外细胞株作为材料，其优点是材料易得而且单纯，易于提取到较完整的高分子DNA。缺点是体外培养过程中，癌细胞的某些原癌基因可发生突变，新的原癌基因也可被激活，因此与体内原发性肿瘤的癌基因谱不一定相同。所以，对某种特定的癌来说，材料来源奕以原发性肿瘤为主，可以癌细胞株的研究提供相互验证。但原发性肿瘤的材料不均一，常伴有坏死，提取高分DNA有时会遇到一定困难，因此在提取DNA时应注意防止DNA的降解 传统的研究技术路线—1环节之二： 高分子DNA的提取用于DNA转染的DNA，要求并不高。在转染前，还将用针筒吸抽或其它机械方法将