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作者简介 郭勇(GuoYong),男,汉族,广东省大埔人,1942年生,1966年毕业于华南工学院(现华南理工大学),1979-1980年在日本东京大学进修,1988-1989年被聘为美国爱达荷大学(University of Idaho)客座教授,1992 年晋升教授,享受政府特殊津贴。 教 材 第一版2000 本课程的目的和要求 教学大纲:本课程为生物技术相关的各专业本科专业课。本课程主要内容包括酶概念、酶的结构与功能、酶催化机制、酶催化反应动力学、酶生物合成调节机理等内容。 在课程中注意对新进展的介绍和典型实例及研究方法的介绍。通过本课程学习要求学生掌握酶学的主要理论、概念、反应机理和反应方程式推导方法,了解相关的新进展,初步打好理学基础。 基本概念要清楚,基础理论要理解, 主要公式要会推会用,研究方法要掌握。 课程内容 教学大纲: 第一章 绪论 第二章 酶的结构与功能 第三章 酶的催化机制 第四章 酶催化反应动力学 第五章 酶的生物合成及调节 以酶学为主,酶工程的内容为辅概述及融入其它章节内容中。 教学内容和方法的特点 1. 和国内院校酶学教学相比 1)和国际接轨; 2)重点解决难点; 3)发挥教师特长。 2. 理论和方法并重。 和一般专业基础课相比更偏重于机理介绍。 3. 有一定的课内、外练习,记分; 期末考试(闭卷)。 本章主要内容 一、酶概念的形成和发展史 二、酶的分类与命名 三、酶的活力测定 四、酶催化作用特点 五、酶的分离纯化 第一节 酶的基本概念与发展史 最早酶的利用:食品加工,面包,酒,醋及奶酪等 利用微生物来源的酶:发酵。 酿酒:BC 2100 古巴比伦 Hammurabi典籍记载; 中国商代“酒池肉林”,酿酒业已很发达,BC1300前; 酿醋出现的时间几乎和酿酒同步,用于制作和储存食品,还用于医药目的。 利用植物和动物来源的酶: 奶酪制作:古意大利记载,使用无花果树的汁和牛胃膜(含凝乳酶)。 近代 近代酶学始自十八世纪; 最早的研究报道是法国科学家Réaumur研究了一种叫buzzard的鸟的胃液对肉块的消化,确定是一种化学变化而非物理变化过程(如溶解),而这个化学变化是很“温和”的条件下实现的。 Spallazani进一步阐明不仅鸟的胃液,其它动物和人的胃液也有类似的作用,这个作用还和温度、胃液加量有关,且在体外是不稳定的,活性会逐渐丧失。 人们开始了解生物体内存在一系列具有催化活性的物质。 1833年, Payen和Persoz 其意为 “分离”; 人们认为这是首次发现酶 中间产物学说; 底物转化为产物之前必须先与酶形成中间复合物,接着再转变为产物并重新获得游离酶; 随着X光晶体衍射,多维NMR技术的发展,很多酶的空间结构被揭示。20年内就有130个以上的酶被结晶。1957年Kendrew第一次用X光衍射方法解析了肌红蛋白的空间结构。至今用X光衍射和NMR研究酶的空间结构已是常见的方法。 1957年,另一个重要进展:Sanger报道了胰岛素的氨基酸系列,这是第一次阐明一个蛋白质的氨基酸全系列。 Monod,Wyman和Changeux提出了别构理论。 与此同时,Clealand发展了多底物多产物的酶动力学原理和公式。 Ribozyme是一种RNA生物催化剂 Ribozyme的发现:RNA具有酶的催化功能是由Cech T.R于1982年提出的。1981年,发现四膜虫(tetrahymena thermophila)的26S rRNA前体在成熟过程中,其居间序列通过剪接反应被除去。并证明四膜虫rRNA前体的居间序列核糖核酸(L-19RNA)具有多种催化功能,将这种具有催化活性的RNA称为 Ribozyme (ribonucleic acid enzyme)。获得1989年诺贝尔化学奖。 rRNA基因的转录产物即 rRNA前体(大约6400个核苷酸残基)很不稳定,在鸟苷和Mg2+存在下切除自身的内含子(intron或intervening sequence,IVS-居间序列或间插序列),使两个外显子(exon)拼接起来,形成成熟的rRNA_——此过程没有任何蛋白质酶参与,称为自我剪接(self-splicing),并证明RNA具有催化活性。 四膜虫rRNA成熟中RNA的剪接示意图 Ribozyme在一定条件下,高度专一地催化下列反应,具有相应酶的活性(底物专一、符合米氏方程、对竞争性抑制剂敏感) 1.核苷酸转移酶活性 2CpCpCpCpC?CpCpCpCpCpC+CpCpCpC 2.磷酸二酯酶活性 CpCpCpCpC ?CpCpCpC+Cp 3.磷酸转移酶活性 CpCpCpCpCpCp+UpCpU ?CpCpCpCpCpC +UpCpUp
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