14.Chapter14蛋白质的生物合成分析报告.ppt

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第十四章 蛋白质的生物合成 第一节 蛋白质合成体系 合成体系: 20种氨基酸, mRNA、tRNA、核糖体、 酶和因子, 无机离子、ATP 、GTP 合成方向: N→C端。 二、参与蛋白质合成的三类RNA及核糖体 1.rRNA 与蛋白质一起构成核糖体——蛋白质合成“工厂” 核糖体的基本功能 结合mRNA,在mRNA上选择适当的区域开始翻译 密码子(mRNA)和反密码子(tRNA)的正确配对 肽键的形成 存在 核糖体可游离存在;真核中,也可同内质网结合,形成粗糙的内质网。原核中,与mRNA形成串状——多核糖体 2. tRNA 特定的tRNA搬运特定的氨基酸,保证了遗传信息传递的准确 结合氨基酸:一种氨基酸有几种tRNA携带,结合需要ATP供能,氨基酸结合在tRNA3‘-CCA的位置。 tRNA在氨基酰-tRNA 合成酶的帮助下,能够识别相应的氨基酸,并通过tRNA氨基酸臂的 3-OH 与氨基酸的羧基形成活化酯-氨基酰-tRNA。 氨基酰-tRNA的形成是一个两步反应过程:第一步是氨基酸与 ATP 作用, 形成氨基酰腺嘌呤核苷酸; 第二步是氨基酰基转移到 tRNA 的 3-OH 端上, 形成氨基酰-tRNA。 氨基酸活化的总反应式是: 氨基酰-tRNA 合成酶 氨基酸 + ATP + tRNA + H2O ?? 氨基酰-tRNA + AMP + PPi 第二节、遗传密码 一、三联体密码的确立 1954年,物理学家Gamouv G首先对遗传密码进行探讨。他认为核酸分子中只有四种碱基,显然碱基与氨基酸的关系不是一对一的关系。若两个碱基决定一个氨基酸只能编码16种氨基酸,也是不够的;而三个碱基对一个氨基酸,四个碱基可产生64个密码,足以编码20种氨基酸,所以编码氨基酸的最低碱基数是3,即密码子可能是三联体。 第三节、蛋白质的合成机制 以mRNA为模板,氨基酸经活化获得的氨酰tRNA为原料,GTP、ATP供能,在核糖体中完成。 第四节蛋白质合成的抑制作用 一、抗菌素 二、毒素 三、抗代谢物 三、抗代谢物 二)、肽链延长: 原料:各种氨基酰-tRNA,EF(Tu,Ts,G), GTP,Mg2+,K+。 1. 进位 Tu-GDP GDP Ts Tu-Ts Tu-GTP GTP Pi Tu-GTP 特异的氨基酰-tRNA进入A位 p A AUG AUG Tu-GTP 2. 转肽 Mg2+, K+ 转肽酶 CH2CH2-CH O C = O CH-R NH2 O= O C H2N CH3 S AUG UAC 给 受 O C O = R-CH NH OH C O= H3CSCH2CH2-CH NH2 AUG UAC 给 受 转肽的 作用机制 摘自: Science. Aug 2000, Volume 289: p. 920. 3. 移位 OH EFG,GTP AUG A 2 1 5′→3′ OH 2 1 AUG 5′ 3′ AUG 2 1 3 AUG 3 1 2 AUG 2 1 3 进位 转肽 移位 转肽 N→C延长 通过进位-转肽-移位不断重复, 肽链自N→C端不断延长 OH EFG,GTP OH A 每生成1个肽键,要消耗2分子GTP(进位和移位), 而氨基酸活化需消耗2个高能磷酸键,每增加1个氨基酸残基实际消耗4个高能磷酸键 真核生物与原核生物肽链延长阶段的不同点: 1. 进位时延长因子是EF-1, 可分为?、?和?三类; 2. 移位时延长因子为EF-2, 其活性可被白喉毒素抑制 三)、终止阶段 RF-3:促使RF-1 或RF-2从核糖体上结合 真核生物仅有一个释放因子:eRF, 可识别三种密码子, 并需GTP参与。 RF-1:UAA,UAG RF-2:UAA,UGA 当mRNA的任一终止信号进入A位时,没有任何tRNA能与之识别,只有释放因子(RF)识别这种信号, 进入终止阶段. 1. 终止密码子的辨认 RF-1 或RF-2 UAA O C O = R-CH A UAA O C O = R-CH UAA RF H-OH 转肽酶 2. 肽链的水解和脱落 OH RF C O = R-CH O RF R-CH C-OH O = 3. tRNA、RF、mRNA的释放,核糖体 大小亚基的解聚 OH RF-3,IF-3 EF-G RF OH RF 核糖体循环: fMet AUG 1. 起始 2. 肽链延长 3. 终止 四、多核

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