发酵工程要点总结.doc

绪论 发酵：通过微生物、动物细胞和植物细胞的培养，大量生成和积累特定的代谢产物或菌体的过程。 发酵工程：是发酵原理和工程学的结合，是研究由生物细胞（包括微生物、动植物细胞）参与的工艺过程的原理的科学，是研究利用生物材料生产有用物质，服务于人类的一门综合性科学技术。这里所指的生物材料包括来自自然界微生物、基因重组微生物等以及各种来源的动物细胞和植物细胞。 发酵工程组成从广义上讲，由三部分组成：上游工程、发酵工程、下游工程 发酵设备 固体发酵 液体发酵（厌氧发酵，好氧发酵） 厌氧发酵：酒精发酵罐 好氧发酵：通风搅拌发酵罐 通风搅拌发酵罐设备主要部件包括： 1罐身 2电机 3搅拌器 4轴封 5消泡器 6联轴器 7中间轴承 8空气吹泡管（或空气喷射器） 9挡板 10冷却装置 1.罐体：罐体由圆柱体或碟形封头焊接而成，材料为碳钢或不锈钢，大型发酵罐可用衬不锈钢或复合不锈钢制成，为了满足工艺要求，罐需要承受一定压力，罐壁厚度决定于罐径及罐压的大小。罐体上的管路越少越好 2.搅拌作用：打碎空气气泡，增加气液接触界面以提高气液间的传质效率使发酵液充分混和。 3挡板的作用：防止液面中央产生漩涡，促使液体激烈翻动，提高溶解氧。竖立的蛇管、列管、排管也可以起挡板作用； 4消泡器：利用机械的方法打碎气泡 5仪表：测量相关参数 为什么压力表不用直管：会有培养基冲入，污染压力表；起不到缓冲作用；灭菌冷却后有冷凝水（含菌）掉入罐内，污染菌种，弯管液封，上面的杂菌不会掉入下面管道中。 6罐体各部分的尺寸有一定比例，高/径比约为2.5～4。 发酵罐的灭菌 （在夹套中）关好空气阀，蒸气上进下出，冲蒸气，压力大于2 kg/cm2（120℃），最好是4～5 kg/cm2（160℃）。当罐内温度80℃，进蒸气口（蒸气阀）关掉，出蒸气口（排气阀）关小。打开空气阀，蒸气直接进罐，121℃，20～30min。从80℃～100℃上升很快，大于100℃后温度上升很慢，到118℃时就开始计时，计时25min时立即关掉蒸气阀。关掉蒸气阀后通入无菌空气，使罐内一直保持正压（高于大气压，空气不会倒灌入罐内）。（在夹套中）立即加自来水冷却，从下向上，使温度尽快降到55℃左右，到37～38℃时关掉水，也有缓冲性。升温降温时注意缓冲性灭菌时蒸气从夹套中进去，如从罐中进去，蒸气冷凝，产生冷凝水、无法接种、容易污染冬天温度低、散热快，低于30℃需加温。加温时蒸气由下进入、从上而出。如从25℃→30℃，加热到28℃时即可关蒸气阀微生物代谢发酵时产生大量热，使温度大于30℃，需考虑适当降温。冷却时冷却水由下进入、从上而出，注意缓冲性，不要降至30℃才关小型罐 50L～7T用夹套系统冷却；大型罐7吨以上，用冷却管（盘肠、列管系统） 发酵罐的管路和死角的消除 1尽量减少管路 2发酵罐的出口越少越好 3出料口和进气管可以合并 4接种管、消泡管、补料管可以合并 5排气管不能合并，易引起交叉污 消灭死角 1丝口连接处改用法兰连接 2焊接部位：堆焊、电焊、氧焊、鱼鳞焊，选用鱼鳞焊 3管道转弯有弧度 4放料管、取料管的阀腔处装小阀 消灭渗漏 罐体穿孔—— 不锈钢 冷却管产生裂缝—— 定期更换 垫圈（法兰连接）松脱—— 拧紧 轴封渗漏—— 轴绝对垂直 焊缝渗漏 阀杆 发酵罐的管道布置 保证蒸气在管道中畅通，有排气口（小阀），接种管、中间补料管、放料管都要有排气口（小阀）避免冷凝水排入已灭菌的罐体或空气，加止逆阀（单向阀）灭菌后的管道用无菌空气保压单向阀位置正确蒸气总管道要有分气缸、排气阀、减压阀、安全阀相邻罐不联通 接种 接种的三种方法 火圈直接倒种 注射器接种 压力差接种 取样 取样阀①关紧，打开蒸气阀②，再打开阀门③，让蒸气冲（消毒杀菌5～10min）； 关上蒸气阀②，打开取样阀①，培养液因压力作用流出；取样后关闭取样阀①，打开蒸气阀②，通蒸气再次消毒，关闭阀门②和③。 进料和出料 发酵罐上的人孔用于加料和维修。出料管可以和进气管合并。 工业发酵菌种选育 重要工业微生物的分离及菌种要求 有的微生物从自然界中分离出来就能被利用，有的需要对分离到的野生菌株进行人工诱变，得到突变株才能被利用。 当前发酵工业所用的菌种总趋势是从野生菌转向变异菌，自然选育转向代谢育种，从诱发基 工业生产常用的微生物： 细菌 枯草芽胞杆菌、醋酸杆菌、棒状杆菌、短杆菌等， 用于生产淀粉酶、乳酸、醋酸、氨基酸和肌苷酸等 酵母菌 单细胞真核生物，常用啤酒酵母、假丝酵母、类酵母等， 用于酿酒、制造面包、生产脂肪酶以及可食用、药用和饲料用酵母菌体蛋白等 霉菌 根霉、毛霉、犁头霉、红曲霉、曲霉、青霉等，用于生产多种酶制剂、抗生素、有机酸及甾体激素等 放线菌 链霉菌属、小单孢菌属和诺卡氏菌属等，能产生多种抗生素，如链霉