低温诱导染色体加倍ty解决方案.pptVIP

探究低温诱导染色体加倍 低温和秋水仙素一样，处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，导致分裂后期染色体不能移向两极，细胞加大而不分裂，着丝点分裂后的染色体仍在一个细胞中，故细胞中的染色体数目加倍。 洋葱：实验课前的3—5d，把洋葱放在盛满水的广口瓶上，让它的底部接触瓶内的水面。 蒜：实验课前的3—5d，取放在盛有少量水的培养皿中培养。 选材时注意选择进行分裂的分生组织细胞，不分裂的细胞染色体不复制，不会出现染色体加倍的情况 卡诺氏固定液的配制：取无水酒精和冰醋酸，按体积比3：1的比例混合： 盐酸酒精解离液的配制：取 95％酒精和15％盐酸，按体积比1：1的比例混合。 质量浓度为10mg／mL的龙胆紫溶液的配制：将100mL的体积分数为45％的醋酸溶液煮沸，加入1g龙胆紫后，搅匀再煮5min，待冷却后过滤，备用 注意：盐酸有刺激性和腐蚀性，应小心使用，避免与皮肤和眼 睛接触。 （1）实验中各种液体的作用 ①卡诺氏液：固定细胞形态。 ②体积分数为95%的酒精：冲洗附着在根尖表面的卡 诺氏液。 ③解离液(体积分数为15%的盐酸溶液和体积分数为 95%的酒精以1∶1混合)：使组织中的细胞相互分 离开来。 ④清水：洗去解离液，防止解离过度影响染色。 ⑤改良苯酚品红染液：使染色体着色，便于观察染色 体的形态、数目、行为。 [特别提醒] 一）根尖的培养 方法1：实验课前的3—5d，把洋葱放在盛满水的广口瓶上，让它的底部接触瓶内的水面。 方法2：实验课前的3—5d，取蒜瓣，放在盛有少量水的培养皿中培养。 二）低温诱导 当根长到lcm时，放入冰箱内4℃低温下培养，处理36h。 三)固定根尖 剪取以上处理的根尖，每个根尖为0．5—1cm，分别放人卡诺氏固定液中固定30——60min，然后用体积分数95％酒精洗两次 卡诺是固定液作用 固定根尖的形态 所观察的细胞被盐酸杀死了，最终在显微镜下观察到的是死细胞 四）制作装片 取固定好的根尖，依次进行： 1.解离：滴加3-4滴解离液进行3-5min的解离 2.漂洗：用清水在载玻片上漂洗5次，约10min 3.染色：滴加3-4滴改良苯酚品红染液进行3-5min 4.制片：加一滴清水在根尖上，盖上盖玻片 注：染色时间要严格控制，不足时染色体看不清，染色过度，染色体一团糟，无法分辨 五）观察装片 先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相，再换上高倍镜并调节细准焦螺旋和反光镜，使物像清晰，仔细观察，辨认哪些细胞发生染色体数目变化 [互动探究] (1)除低温诱导外，还有哪些常用的诱导染色体数目加倍的方法？试简述其原理。 提示：除低温诱导外，生产上还常用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗来诱导染色体数目加倍。其原理是：当秋水仙素作用于正在分裂的细胞时，能够抑制纺锤体的形成，导致染色体不能移向两极，从而引起细胞内染色体数目加倍。 (2)若该实验不用洋葱而用干燥的蚕豆，如何来培养根尖？ 提示：把50颗干燥的蚕豆种子浸在清水中一昼夜，使其吸胀萌发，然后放在盛有少量清水的培养皿中培养。