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专题一基因工程 【复习要求】 说明基因工程的工具的来源及作用 举例说明基因工程基本操作程序 列举基因工程在各个领域的实际应用 阐明蛋白质工程崛起的缘由及原理 【学习过程】 复习检测：1.构建知识网络 2.蛋白质工程与基因工程的比较 蛋白质工程 基因工程 过程 （4步）： （4步）： 实质 定向改造或生产人类所需的 （ ） 定向改造生物的（ ），以获得人类所需的（ ） 结果 生产自然界（ ）的蛋白质 生产自然界（ ）的蛋白质 联系 对蛋白质结构进行改造，最终还必须通过（ ）来完成；基因工程所利用的某些（ ）需要通过蛋白质进行修饰改造。 重点突破 知识点一 与DNA分子相关的酶 问题：在DNA分子复制以及基因工程的操作过程中需要用到的几种酶，请填写下表对上述几种酶的比较 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 作用底物 作用部位 作用结果 练习： 1、下列有关基因工程叙述错误的是（ ） A、限制酶可用于目的基因的获取 B、运载体和目的基因需要 用同一种酶处理 C、基因工程所用的工具是限制酶、运载体、DNA连接酶 D、常用的运载体是质粒、细菌、动植物病毒 2、已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是A.3 B.4 C.9 D. 12 3、（05天津）限制酶Ι的识别序列和切点是—G‘ATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—’GATC—。在质粒上有酶Ι的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点，用上述两种酶分别切割质粒和含有目的基因的DNA。 请画出质粒被限制酶Ι切割后所形成的黏性末端 （2）请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端 （3）在DNA连接酶的作用下，上述两种限制酶切割后形成的黏性末端是否能连接起来，为什么？ 知识点二基因工程操作的基本程序 思考并回答下列问题： 问题1：实施基因工程的第一步是获取目的基因，获取的方法有哪些？ 问题2：在构建表达载体时，需要用到哪些工具？如何构建表达载体？ 问题3：什么叫转化？将目的基因导入植物、动物、微生物细胞中的方法和过程有什么区别？（从方法和受体细胞等方面入手） 问题4：为什么要进行目的基因的检测与鉴定？如何进行？ 练习： 1、（09浙江卷）下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ） A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 2、为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系（1） 获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制酶作用于图中的______处，DNA连接酶作用于___________处。（填a或b） （2）?将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和___________法。 （3）?由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用_________________技术，该技术的核心是_______________和_______________。 （4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_________作探针进行分子杂交检测，又要用________________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。 科学家将β-干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高β-干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性。该生物技术为A．基因工程 B．蛋白质工程 C．基因突变 D．细胞工程科学家将β-干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高β-干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性。该生物技术为A．基因工程 B．蛋白质工程 C．基因突变 D．细胞工程在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（ kan ）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那