发酵机制 - 副本.doc

1：什么是莫诺方程？其中饱和常数k值的物理意义？ μ=μmax S/（Ks+ S）μ：菌体的生长比速 S：限制性基质浓度 Ks：半饱和常数 　　μmax:最大比生长速度Ks的物理意义：当比生长速率为最大比生长速率的一半时，Ks在数值上等于限制性营养物的质量浓度，其大小表示微生物对营养物质吸收亲和力的大小，即Ks最大，微生物对营养物的亲和力越小。 2：分批培养发酵中，菌体的生长规律是什么？ 在分批培养发酵中，随着细胞浓度和代谢浓度的不断变化，主要分为四大阶段： ）延滞期:活菌数没增加，曲线平行于横轴,特点：生长速率常数= 0；细胞形态变大（长）；细胞内RNA特别是rRNA含量增高；合成代谢活跃，易产生诱导酶；对外界不良条件敏感 ）对数期:细胞数目以几何级数增加，其对数与时间呈直线关系。即生长速率常数最大;平衡生长;代谢最旺盛;对理化因素较敏感 3）稳定期①细胞增殖与死亡数几乎相等，细胞数达最高值；②开始积累内含物或产芽③开始合成次生代谢产物 ）衰亡期 ①出现“负生长”；②细胞出现多形态变化；③菌体死亡、自溶孢； 3：什么是分批发酵？有什么优缺点？ 定义：在一个密闭系统内一次性投入有限数量的营养物进行培养的方法。 优点：操作简单；引起染菌的概率低；不会产生菌种老化和变异等问题。 缺点：非生产时间较长，设备利用率低； 4：什么是补料分批培养？有什么优缺点？ 其是指在分批发酵过程中，间歇或连续的补加新鲜培养基的发酵方式。 优：使发酵系统中维持很低的基质浓度；和连续发酵比，不需要严格的无菌条件；不会产生菌种老化和变异等问题。 缺：存在一定的非时间生产；和分批发酵比，中间要流加新鲜培养基，增加了染菌的危险。 5：什么事连续发酵，有什么优缺点？ 其是在开放系统中进行的，指以一定的速率向发酵罐内添加新鲜培养基，同时以相同的速率流出培养液，从而使发酵罐内的液量维持恒定，使培养物在恒定的状态下生长的培养方法。 优：提供了一个微生物在恒定状态下高速生长的环境，便于进行微生物代谢，生理生化和遗传特性的研究；在工业生产中可减少分批培养中每次清洗，装料，消毒，接种，放罐等操作时间，提高生产效率和自动化程度；连续培养生产出的发酵产品，质量比较稳定。 缺：菌种易发生突变和退化；易染菌；营养物质利用率低；不易混合均匀；不易菌丝体输送。 6：两个传递途径和传质阻力是什么？ 供氧：空气中的氧从空气泡里通过气膜、气液界面和液膜扩散到液体主流中。 耗氧：氧分子自液体主流通过液膜、菌丝丛、细胞膜扩散到细胞内 供氧方面的阻力：气膜；气液界面；液膜，发酵液是该过程的主要阻力。 耗氧方面的阻力：胞外液膜；菌丝丛；细胞膜；胞内传递；是该过程的主要阻力。 7：试分析影响氧传递速率的主要因素？ （1）搅拌改善溶氧速率 ①打碎气泡，增加接触面积②液体做涡流运动，增加接触时间③发酵呈湍流，减少液膜阻力，KLa增加④打散菌体，使推动力均一。 （2）、空气线速度 KLa与空气线速度Vs的关系；KLa ∝ Vs?Β在0.4～0.72之间。 （3）空气分布管 空气分布管的形式、喷口直径、管口与罐底距离；空气分布装置：单管、多孔环管、多孔分支环管。d/D＞0.3～0.4时，管口距罐底20～40mm；d/D＝0.25～0.3时，管口距罐底40～60mm。（4）、氧分压：平衡状态时液体中氧的溶解度（5）发酵罐内液体柱高度（6）发酵罐体积发酵罐大罐气液接触时间长、氧的溶解度高，搅拌和通风小些 （7）发酵液的物理性质：粘度、表面张力、离子浓度 8：工业上提高溶氧速率的有效措施是什么？ 通风;搅拌 , 向发酵液中加少量氧载体。 9：温度/PH/泡沫对微生物的生长和发酵有什么影响？如何控制？ 温度不仅对微生物菌体表面有作用，并且因热平衡的关系，热量可以传递到菌体内，对菌体内的所有物质和结构都有作用。微生物不仅被温度直接决定酶的反应，还对微生物的生长发育旺盛与否都有关 温度可以影响发酵液中溶氧从而影响发酵，还能影响生物合成的方向。还能影响酶系统和酶活性 应该把温度控制在最适的生长温度范围内。 Ph对微生物及发酵的影响 生长和代谢均有一定范围；不同菌种及同种菌在不同代谢时期pH值不同。 pH对发酵的影响：酶活性；细胞的结构；微生物对基质的利用速率；代谢方向； 在发酵过程中进行控制：①添加碳酸钙 ②氨水流加法 ③尿素流加 泡沫对发酵的影响； ①减少发酵的有效容积； ②增加了染菌的机会； ③使部分菌体粘附在罐盖或罐壁上，而失去作用； ④影响通气搅拌的正常进行； 控制：运用化学消泡和机械消泡的方法 10：机械消泡和化学消泡的作用机理和优缺点？ 化学消泡作用机理：当把化学消泡剂加入起泡体系后，由于消泡剂本身的表面张力比较低，使气泡膜局部的表面张力降低，力的平衡受到破坏，此处为周围表面张力较大的膜