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发酵法生产番茄红素 摘要 番茄红素是由11个共轭双键及2个非共轭碳碳双键构成的高度不饱和直链型烃类化合物，具有预防癌症、防治心血管疾病、缓解骨质疏松症和提高免疫等重要的生理功能。番茄红素的生产方法主要有提取法、化学合成法和微生物发酵法。由于番茄红素含量低，提取法无法满足市场需求；化学合成法存在收率低、产物不稳定以及合成成本高等缺点；发酵法被认为是生产番茄红素最有潜力的方法，文中对发酵法生产番茄红素的关键技术环节(如菌种选育、发酵工艺优化和分离纯化)的研究进展进行了阐述。 关键词 番茄红素，发酵工程，菌种选育，发酵工艺优化，分离纯化 番茄红素是存在于自然界中的一种天然色素,呈红色, 因最早发现于番茄中得名。番茄红素(Lycopene)是类胡萝卜素(Carotenoid) 的一种。主要存在于植物细胞的有色体中,其中番茄中含量最高,达3-14mg/100g，是由l1个共轭双键及2个非共轭碳碳双键构成的高度不饱和直链型烃类化合物，分子式C40H56，分子量536.85。番茄红素结晶为暗赤色针状或柱状晶，熔点175℃，易溶于氯仿、苯，可溶于乙醚、石油醚、己烷、丙酮，难溶于甲醇、乙醇，不溶于水。性质十分活泼，易受氧、紫外线、温度的影响而迅速氧化。在酸性环境和有CO2存在的条件下以及温度低于50℃的酸性条件下,色素性能稳定。 在自然界中番茄红素主要存在于番茄、西瓜等蔬菜水果中。1903年Schundc发现番茄中提取的番茄红素的吸收光谱不同与胡萝卜素，将其命名为Lyco-pene。番茄红素是类胡萝卜素生物合成途径中的一个中间代谢产物。美国学者最近发现秋橄榄浆果所含的番茄红素相当于番茄的1.8倍。番茄红素与其他类胡萝卜素一样,动物自身不能合成。由于番茄红素没有类似胡萝卜素那样的芷香环而没有VA活性,在过去一直不被重视。然而,近年研究发现其具有优越的生理功能:在类胡萝卜素中,其抗氧化作用最强。其对单线态氧的淬灭作用是β-胡萝卜素的2倍,维生素E的100倍。同时还具有防病抗癌,增强机体免疫力和抗衰老等生理功能,在食品、化妆品以及医药领域具有重要用途,具有较高的开发和应用价值。 目前世界上番茄红素的开发生产主要有天然提取、化学合成、微生物发酵等方法。以色列、日本、瑞典、瑞士、美国、法国和澳大利亚等国家以及罗氏、巴斯夫等跨国公司在此方面处于领先地位,但目前只在以色列实现了从鲜番茄中提取的商业化生产。由于番茄中的番茄红素含量很低,而且天然提取法产率低且价格昂贵,无法满足需求，而化学合成法成本虽有所下降但存在一定不安全性。随着生物技术的快速发展,利用微生物发酵生产番茄红素成为目前的研究热点之一。 1 番茄红素的生产方法 番茄红素的生产方法主要有提取法、化学合成法及发酵法。 1．1 提取法 在自然界中番茄红素主要存在于番茄、番石榴及西瓜等蔬菜水果中。尤其在番茄中，番茄红素主要存在于番茄的表皮中，含量为(8．8—42．0)×10 mg／g(鲜重)。以提取法从番茄中提取番茄红素产率低，且生产受季节影响明显，加之价格昂贵，无法满足市场需求。 1．2 化学合成法 化学合成番茄红素主要是Wittig反应法，以假紫罗兰酮为原料合成三苯基氯化磷，三苯基氯化磷与辛三烯二醛、甲醇在2-丙醇中反应。化学合成法由于双键立体选择性难以控制致使产物不可控，且使用的化学试剂在产品中会有不同程度的残留。番茄红素作为一种药或功能食品，对纯度有较高的要求，而且大量化学试剂的使用会造成环境污染，从而限制了产品质量及使用范围。 异戊烯焦磷酸(IPP)作为番茄红素合成途径中第1个较为直接的前体物质, 是由葡萄糖转化而来。番茄红素的类异戊二烯代谢途径合成过程详见图1。番茄红素经环化酶作用可形成多种类胡萝卜素。对革兰氏阴性菌欧文氏菌代谢途径的研究发现从法呢基焦磷酸(FPP)合成番茄红素是由3 个crt基因(crtE,crtB,crtI)控制 1．3 发酵法 发酵法利用特定微生物的代谢将淀粉、葡萄糖、黄豆饼粉等廉价原料转化为番茄红素，不受原材料、地理环境和气候等因素影响，工艺简单、生产周期短、生产效率高、生产成本低，且产物质量可控，并减少了对环境的污染。最重要的是发酵法生产的番茄红素属于天然型产品，其活性与天然植物提取的活性成分一致，且与合成法生产的相比易于人体吸收。下面着重对发酵法生产番茄红素的关键技术环节，如菌种选育、发酵工艺优化以及下游分离纯化技术进行综述，并对发酵法生产的趋势进行了展望。 2 发酵法生产番茄红素 2．1 菌种选育 用于发酵法生产番茄红素的微生物主要为三孢布拉氏霉菌(Blakeslea trisp0m)，经基因改造的酵母菌(Saccharomyces)，红色细菌(Rhodobacillus palus—tris)以及革兰氏阴性非光合菌。 菌种选育