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①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得 DNA最大限度地析出 ⑤使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得 DNA最大限度地析出 ⑤使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 ⑥除去含DNA的滤液中的杂质 ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得 DNA最大限度地析出 ⑤使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 ⑥除去含DNA的滤液中的杂质 ⑦提取DNA ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得 DNA最大限度地析出 ⑤使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 ⑥除去含DNA的滤液中的杂质 ⑦提取DNA ⑧A出现蓝色 B无变化 讨 论 讨 论 此实验过程中有几次过滤,几次析出?分别在哪一步? 讨 论 答: 整个实验共“两次过滤,两次析出” 此实验过程中有几次过滤,几次析出?分别在哪一步? 两次过滤 两次过滤 第一次: DNA存在于滤液里 第一步 第二次: DNA存在于滤液里 第六步 过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关,第二次要用其滤出的黏稠物有关,所以要使用多层纱布,第一次和第三次均要用其滤液,使用的纱布为1-2层 两次过滤 第一次: DNA存在于滤液里 第一步 第二次: DNA存在于滤液里 第六步 ③两次析出 ③两次析出 第一次:用0.14 mol/L 的NaCI溶液 ③两次析出 第一次:用0.14 mol/L 的NaCI溶液 第三步 ③两次析出 第一次:用0.14 mol/L 的NaCI溶液 第三步 第二次:用冷却的95%的酒精 ③两次析出 第一次:用0.14 mol/L 的NaCI溶液 第三步 第二次:用冷却的95%的酒精 第七步 专题5 DNA和蛋白质技术 课题1 DNA的粗提取与鉴定 讨论1:生物体的遗传物质是什么? 讨论2:真核生物的遗传物质存在于哪里? 讨论1:生物体的遗传物质是什么? 讨论2:真核生物的遗传物质存在于哪里? 讨论1:生物体的遗传物质是什么? 讨论3:怎样才能将真核细胞内的遗传物 质分离来? 基本知识 0 溶解度 NaCl浓度 0.14mol/L 2mol/L 一、DNA的溶解性 基本知识 2mol/L浓度可使DNA溶解; 0.14mol/L浓度可使DNA析出。 0 溶解度 NaCl浓度 0.14mol/L 2mol/L 一、DNA的溶解性 二、酒精是一种常用有机溶剂,但DNA却 不能溶于酒精; 三、蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA 没有影响 四、大多数蛋白质不能忍受60-80℃的 高温,而DNA在80℃以上才会变性 五、洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜,去 除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响 DNA的鉴定 ①DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 ②甲基绿(绿色) (一)实验材料的选取: 用什么材料提取DNA?为什么? 实验设计 (一)实验材料的选取: 鸡血细胞做实验材料。原因: 1. 鸡血细胞核DNA含量丰富,材料易得 2. 鸡血细胞极易吸水胀破 3. 植物细胞外有细胞壁,其他动物细胞制取DNA有时需匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长。 (二)破碎细胞,获取含DNA的滤液 1. 若是动物细胞,如何获取DNA滤液? 2. 若是植物细胞,如何获取DNA滤液? (二)破碎细胞,获取含DNA的滤液 1. 若是动物细胞,如何获取DNA滤液? 加入洗涤剂和食盐的作用分别是? 如果研磨不充分,会对实验结果产生什么影响? 加入洗涤剂和食盐的作用分别是? 如果研磨不充分,会对实验结果产生什么影响? 洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA释放;食盐有利于DNA溶解 加入洗涤剂和食盐的作用分别是? 如果研磨不充分,会对实验结果产生什么影响? 洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA释放;食盐有利于DNA溶解 会使细胞核内DNA释放不完全,提取DNA量变少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝
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