高中生物 1.1.1基因工程的原理课件 中图版选修3 .pptVIP

1.(2011·海南高考)回答有关基因工程的问题： (1)构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制性内切酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生_____末端。若要在限制性内切酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____(相同、不同)黏性末端的限制性内切酶。 (2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_____。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用_____处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为_____。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成_______，常用抗原—抗体杂交技术。 (3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的_____上。 【解析】(1)限制性内切酶切割产生两种末端：黏性末端和平末端；若用DNA连接酶连接两个末端，两个末端必须是相同的。 (2)基因工程检测的方法：检测目的基因是否导入，使用DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录，使用分子杂交技术；检测是否形成蛋白质，使用抗原—抗体杂交技术。 (3)基因工程的目的是获得稳定遗传的新品种，因此要把目的基因插入到染色体的DNA分子中。 答案：(1)平 相同 (2)RNA聚合酶识别和结合的部位 Ca2+ 分子杂交技术 蛋白质 (3)T-DNA 染色体DNA 2.(2012·烟台模拟)降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条各含72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图。 在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题： (1)Klenow酶是一种_____酶，合成的双链DNA有_____个碱基对。 (2)获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。 ①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它_____。 ②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是_____。 ③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_______。 (3)经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_____。 (4)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是_____。 【解析】Klenow酶催化了原料按照模板链通过碱基互补配对相连，故属于DNA聚合酶；合成双链后碱基对数是72×2－18；大肠杆菌具有繁殖快、代谢旺盛等特点；若只用一种限制性内切酶处理，则目的基因和载体的末端可以任意连接，可形成多种重组体、环状DNA等，用两种限制性内切酶处理后可保证目的基因和载体定向连接；题干中已给出提示“合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象”。 答案：(1)DNA聚合 126 (2)①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少 ②保证目的基因和载体定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接) ③标记基因 (3)合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基(或脱氧核苷酸)的现象 (4)蛋白质工程 3.(2012·安庆模拟)如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答： (1)在基因工程中，A表示目的基因，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶所具备的特点是_____。 (2)B→C为转基因绵羊的培育过程，其中④用到的生物技术主要有_____和_____。 (3)B→D过程中，若使用的棉花受体细胞为体细胞，⑤所表示的生物技术的核心是_____。要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后，是否能表达，需进行检测和鉴定，请写出在个体水平上的鉴定过程：_____。 【解析】①过程使用的酶是限制性内切酶；④需要用到早期胚胎培养、胚胎移植等技术；⑤过程是由植物细胞得到植株的过程，利用的是植物组织培养技术；个体水平的鉴定就是看植株个体是否表现出抗虫性状。 答案：(1)能够识别某种特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割 (2)早期胚胎培养 胚胎移植 (3)脱分化、再分化 让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定转基因棉花是否具有抗虫性状 4.(2012·济南模拟)最新研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物