高中生物 1-2基因工程的基本操作程序配套课件 新人教版选修3.pptVIP

目的基因导入受体细胞的结果分析 说明：上图中发生②与发生①相比，②会使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，原因是在进行细胞分裂时，细胞核上的DNA经复制后平均分配到两个子细胞中，保证了亲子代遗传性状的稳定性，而①细胞分裂时，细胞质是不均分的，子细胞不一定含有目的基因。 【巩固3】 目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是 (　　)。 ①检测受体细胞是否有目的基因　②检测受体细胞是否有致病基因　③检测目的基因是否转录mRNA　④检测目的基因是否翻译蛋白质 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ 解析　目的基因的检测包括：首先检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是用DNA探针，使DNA探针与基因组DNA杂交；其次检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是用基因探针与mRNA杂交；最后检测目的基因是否翻译了蛋白质，方法是进行抗原—抗体杂交。 答案　C 【例1】 水稻种子中70%的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。 目的基因的获取 据图回答下面的问题。 (1)图中基因组文库______(填“小于”“等于”“大于”)cDNA文库。 (2)B过程需要的酶是___________________________________； A、C过程中________(填“可以”“不可以”)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。 (3)目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中________和________为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是_____________________________________。 思维导图： 深度剖析　基因组文库包含本物种全部遗传信息，cDNA文库仅包含部分遗传信息；由mRNA构建cDNA文库需逆转录酶，筛选目的基因时，可用同一种探针对由基因组文库或cDNA文库中获取的目的基因予以检测，若通过PCR技术扩增目的基因，可利用DNA或cDNA作为模板，该扩增过程需耐高温的DNA聚合酶参与。 答案　(1)大于　(2)逆转录酶　可以　(3)DNA　cDNA　耐高温 【例2】 α1-抗胰蛋白酶缺乏症是北美常见的一种单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。利用基因工程技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1-抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更容易获得这种酶。 基因表达载体的构建与转化 下列关于该过程的叙述中错误的是 (　　)。 A．载体上绿色荧光蛋白基因(GFP)的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞 B．将目的基因导入羊膀胱细胞中，将会更加容易得到α1-抗胰蛋白酶 C．培养出的转基因羊的所有细胞中都含有该目的基因，故该羊有性生殖产生的后代也都能产生α1-抗胰蛋白酶 D．目的基因与载体重组过程需要DNA连接酶的催化作用 思维导图： 深度剖析　基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等；将目的基因导入动物细胞，常以受精卵作为受体细胞；将目的基因与载体结合，需要DNA连接酶的催化作用。 答案　C 思维拓展　基因表达载体的几个关键组成的作用： 标记基因——便于筛选；目的基因——使转基因生物获得我们所需的性状；启动子——启动目的基因的转录；终止子——终止目的基因的转录；复制原点——使DNA复制以便于进行表达载体的扩增。另外，一般情况下常用同一种限制酶切割目的基因和载体，以便于表达载体的构建，但是特殊情况下，用不同的限制酶切割目的基因和载体，如果切出的黏性末端相同，也是可行的。 【例3】 在判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中，不属于分子检测的是 (　　)。 A．通过观察害虫吃棉叶是否死亡 B．检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带 C．检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带 D．检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带 目的基因的检测与鉴定 思维导图： 深度剖析　A项属于个体生物学水平的鉴定，不是分子检测。B、C两项为分子检测，利用分子杂交技术，观察目的基因及目的基因转录形成的mRNA能否与DNA探针进行杂交形成杂交带；D项也为分子检测内容，利用抗原－抗体杂交的原理，检测基因表达产物能否与特定抗体形成杂交带。 答案　A 温馨提示　(1)DNA探针是用放射性元素或荧光分子标记的目的基因的脱氧核苷酸单链。 (2)进行转录水平的检测原理与复制水平