(精)免疫比浊法检测免疫球蛋白.pptVIP

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  • 2017-01-07 发布于湖北
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免疫比浊法检测免疫球蛋白 透射比浊法测定原理 透射比浊法的缺陷: (1)溶液中存在的抗原-抗体复合物分子应足够大,分子太小则阻挡不了光线的通过。 (2)溶液中的抗原-抗体复合物的数量要足够多。如果数量太小,溶液浊度变化太小,对光通量影响不大。 (3) 透射比浊是依据透射光减弱的原理来定量的,因此只能测定抗原-抗体反应的第二阶段,检测仍需抗原-抗体温育反应时间,检测时间较长。 散射比浊法 散射比浊法测定原理 2.终点散射比浊法 散射比浊法的缺陷 (1)因为是一次性测定光吸收值,没有考虑每一个待测样本的吸收和散射效果,可测定结果不准确 (2)测定的仍是抗原-抗体反应的第二阶段,不适合快速检测。 (3) 终点法存在反应本底,测定样本的含量越低本底比例越大,故在微量测定时,本底的干扰是影响准确测定的重要因素。 影响免疫比浊测定的因素 1、抗原抗体比例 2、抗体的质量 抗体的特异性、效价、亲和力 3、反应的溶液 4、增浊剂的使用 * 免疫学系 实验原理 免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中特异结合,产生一定大小的复合物,形成光的折射或吸收,测定这种折射或吸收后的透射光或散射光作为计算单位。 免疫比浊法分类 当一束光 线通过溶 液受到光 散射和光 吸收两个 因素的影 响而使光 的强度减 弱 透射比浊法: 在光源的光路方向(00) 测量透射光强度和被检测 溶液微粒浓度关系

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