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单元整合提升 学法指导——建立自己的错题档案 单菌落分离中的三个重复组与两种对照组 (1)设置重复组的目的及过程 ①目的:增强实验的说服力与准确性。 ②过程:将待测样品经一系列10倍稀释,然后选择三个稀释度的菌液,分别取0.1 mL接种到已制备好的平板上,然后用无菌涂布器将菌液涂布整个平板表面,放在适宜的温度下培养计算菌落数。为使结果接近真实值,可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板上,经涂布、培养,计算出菌落平均数。 (2)两种典型对照培养基:①未接种的选择培养基与选择培养基对照并一起培养,用于确认培养基制备是否合格——若对照组中无菌落生长表明培养基制备合格、灭菌彻底。 ②接种的普通培养基:与选择培养基对照用以确认选择培养基是否起到了选择作用——若选择培养基上,菌落种类数量明显少于普通培养基,则表明该培养基起到了筛选作用。 (3)单菌落分离与培养结果分析与评价: 内 容 现 象 结 论 有无杂 菌污染 的判断 对照的培养皿 中无菌落生长 未被杂菌污染 培养物中菌落数偏高 被杂菌污染 菌落形态多样, 菌落数偏高 培养物中混入其他氮源 选择培养基的筛选作用 牛肉膏培养基上的菌落数目大于选择培养基上的数目 选择培养基具筛选作用 样品的稀释操作 得到2个或2个以上菌落数目在20个以内的单菌落 操作成功 【训练1】 在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时,甲组实验用氮源只含尿素的培养基,乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基,其他成分都相同,在相同条件下操作,培养与观察,则乙组实验属于 ( )。 A.空白对照 B.标准对照 C.相互对照 D.条件对照 解析 该实验中,甲组是实验组,乙组是对照组,给甲组某种处理,给乙组另一种条件的处理,则乙组应该是条件对照。 答案 D 【训练2】 请回答下列问题。 (1)下列材料或用具中:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管;③实验操作者的双手,需要灭菌的是:________;需要消毒的是:________。(填序号) (2)在进行分离分解尿素的细菌的实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________(填序号)。 ①土样不同 ②培养基受到了污染 ③操作失误 ④没有设置对照 (3)简述土壤中可分解尿素细菌的鉴定方法及原理:_______________。 解析 培养基上筛选出的细菌数量与是否设置对照无关。 答案 (1)①和② ③ (2)①②③ (3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,氨会使培养基的碱性增强,pH升高,使酚红指示剂变红
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