第四章 组织培养的基本操作技术
第四章 植物组织培养的基本操作技术 1 器皿、工具的洗涤 要用洗涤剂去掉油脂和有机物;用1%左右的盐酸可将可溶性无机物洗去 洗液的配制 40克工业用重铬酸钾溶于加热100毫升水,冷却后慢慢加900毫升工业用浓硫酸,边加边搅拌,在玻璃缸或瓷缸中加盖备用。 2 灭菌方法 培养基营养丰富,适合微生物生长,极易污染,微生物生长大大快于植物学组织,大量消耗营养 为防止污染,应注意; 不与微生物或病理工作者共用组织培养工作区 一但发现污染,立即将污染的培养物拿出培养室进行灭菌处理 有菌的概念 凡是暴露在空气中未经处理的物体,曾经接触过自然水源的物体表面,都是有菌的 菌的特点是无处不在,无孔不入,在自然而然条件下忍耐力强。生活条件下要求简单,繁殖力强。 菌:包括细菌、真菌、放线菌、藻类及其它微生物。这些生物个体极小,肉眼看不到。 无菌的概念 经过高温灼热或煮过足够长时间的物体,经其它物理或化学灭菌方法处理后的物体,有可能是无菌的。 高层大气、岩石内部、健康的植物动物内部不与外表面接触的组织内部有可能是无菌的 强酸强碱、化学灭菌剂等是无菌的 杀菌方法 物理方法:高温 湿热(121 1.1 15-20分钟 ) 和干热(160-180 2-3小时) 高压锅操作加水 放入物品 加热 排除冷空气 稳压 冷却 接种工具、瓶子、滤膜、针头、针管、容器等到可用这种方法
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