第二章蛋白质化学-2教程方案.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 1、双缩脲反应(紫色配合物) 2、酚试剂反应（Tyr的酚基将福林试剂还原） 3、茚三酮反应（紫色,或黄色-Pro） 4、考马斯亮蓝反应（染料结合法） 七、蛋白质的颜色反应 作业 1、蛋白质的构象数目为什么只有一种或几种? 2、变性与沉淀的关系如何?试述盐析沉淀蛋白质的基本原理及其优缺点. 3、什么是蛋白质的一级结构?为什么说蛋白质的一级结构决定其二级结构? * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 血红蛋白分子中亚基间有次级键相连，其中有8个离子键把4个亚基连成一个紧密的结构，空间结构受到约束，而不利于和O2结合。 ?-亚基与O2的结合无空间障碍，可以首先与O2结合，而?-亚基因为Val侧链的影响不能与O2结合； 当?-亚基与O2结合后，血红素上铁的连接键从5个增加到6个，铁原子直径减小，可以全部移入卟啉环的中央间隙，导致亚基之间的离子键断裂，引起构象变化，消除了结合O2的空间障碍，使?-亚基也能与O2结合 一个亚基对O2的结合促进了其它亚基与O2结合，因此血红蛋白与O2结合的饱和度随氧分压的升高而加快，并且呈S型曲线 相反，当第一个O2从血红蛋白脱落后，引起构象变化，加快另三个O2的脱落速度。 血红蛋白成为一种高效的运输工具。 4、一级结构的细微变化，可能会使得其空间结构发生了改变，从而改变它的性能。 ——免疫球蛋白的结构与功能的关系 象多糖、核酸和蛋白质类等的外来大分子物质或者细菌、病毒等颗粒(一般称为抗原)侵人机体时，机体的免疫系统会产生相应的被称为抗体的物质与之反应，这就是所谓的免疫反应。抗体是高等脊椎动物获得性免疫反应的效应分子。 人类产生的抗体种类很多，其化学本质均属于球蛋白，并具有相似性。 每条轻链大约含220个氨基酸残基 N端的大约l10个残基组成的区域，氨基酸排列顺序可以改变，称为可变区(variableregions)，用V表示。 C端的大约110个氨基酸残基比较保守，不易改变，称为保守区(constantregions)，用C表示。 轻链特点： 每条重链大约含有440个氨基酸残基。 N端有大约ll0个氨基酸残基组成可变区结构域。 C端有三个保守区结构域，它们的结构相似，分别用CH1、CH2和CH3表示。 抗原结合部位： 重链和轻链的可变区共同形成了抗原结合部位。 重链特点： 也称为互补决定区，简称CDR 它是指可变区内某些氨基酸变化特别频繁的部位。它是与不同抗原特异性结合的结构基础，决定了抗体的专一性。轻链、重链可变区内都有CDR。 超变区（CDR）： 不同抗体分子之间结构的区别主要就在可变区，特别是超变区，由于可变区个别氨基酸的变化（即一级结构的细微变化），使得其空间结构发生了改变，从而产生了不同的抗体特异性。 5、蛋白质分子的修饰和多肽链局部的断裂 ，可以形成特定的空间结构 ，从而形成新的功能 （1）有些蛋白质合成后，肽链中的某些氨基酸须进行修饰才能表现其生物活性； （2）有些蛋白质刚合成出来时，是以前蛋白质原的形式存在，无生物活性，须经特异性分子断裂才成为有活性的蛋白质。 如胰岛素等。 第六节 蛋白质的性质 一、蛋白质分子的大小 大分子，分子量大（几万——几百万） 测定分子量方法： 1、根据化学组成测最低分子量 2、蛋白质的渗透压 3、蛋白质的沉降超速离心机 沉降常数S(1-200S) 4、凝胶过滤法 5、SDS法 由于蛋白质的基本组成单位是氨基酸，因此蛋白质是两性电解质，既可与酸，又可与碱相互作用。 蛋白质等电点（pI）: 在某一pH时，蛋白质分子中所带的正电荷数目与负电荷数相等，即净电荷为零，在电场中不移动，此时溶液的pH值即为该种蛋白质的等电点（pI）。 二、蛋白质的两性性质和等电点 1、不同蛋白质，由于氨基酸组成不同，等电点不同，在同一pH条件下所带净电荷不同。 蛋白蛋两性解离所带来的特点： 蛋白质 等电点 蛋白质 等电点 胃蛋白酶 1.0 ?-糜蛋白酶 8.3 卵清蛋白 4.6 ?-糜蛋白酶原 9.1 血清蛋白 4.7 核糖核酸酶 9.5 ?-乳球蛋白 5.2 细胞色素C 10.7 胰岛素 5.3 溶菌酶 11.0 血红蛋白 6.7