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- 2017-01-08 发布于贵州
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科研-教学实验内容科研-教学实验内容
实验1 复方罗布麻片中山奈酚的含量测定
[实验目的]
1.掌握Waters2695型高效液相色谱的操作方法。
2.掌握用高效液相色谱测量主要化合物含量。
[实验原理]
复方罗布麻片是复方中药制剂,临床用于降血压,罗布麻叶是该复方君药(主要药材),山奈酚是主要活性物质,因此检测复方罗布麻片中山奈酚含量对该药品的质量控制起到重要的作用。山奈酚结构如图1所示。
图1 山奈酚结构
高效液相色谱法是一种分离和检测方法,由进样系统,色谱柱,流动相泵和检测系统组成,主要用于单体化合物的分离和检测。
高效液相色谱系统分离的关键部分是固定相和流动相。固定相为固体,用于吸附物质,流动相由乙腈和水组成,乙腈是有机溶剂,极性偏弱,洗脱能力强,水极性强,洗脱能力弱。通过调整乙腈和水的比例,以控制流动相的洗脱能力,首先将极性化合物洗脱出来,之后再将弱极性化合物洗脱出来,以达到分离化合物的目的。
试验过程中,首先,仪器将样品溶液注入色谱柱内,色谱柱内的C18硅胶会将样品吸附在色谱柱内的前端,以乙腈和水作为流动相,洗脱色谱柱内的化学成分。柱内的化学成分会依据极性大小而被逐个洗脱出来。不同的进样量会产生不同的峰面积。因此,以山奈酚对照品的进样量为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。通过样品的峰面积计算样品中山奈酚含量。
山奈酚对照品及样品高效液相色谱图如图2和图3所示
[仪器与试剂]Waters
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