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2.2 动物细胞工程2.2.1 动物细胞培养和核移植技术目标导航 1.结合图2-16及相关内容,归纳动物细胞培养的过程、条件及应用。2.结合图2-21,归纳通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景。一、动物细胞工程(阅读P44)基础技术手段应用动物细胞培养技术动物细胞培养、体细胞核移植、细胞融合①深入探索并改造生物的遗传特性②大量培养细胞③单克隆抗体的制备等二、动物细胞培养(阅读P44-46)1.概念从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。2.过程动物组织块或器官单个细胞细胞悬液原代培养―→传代培养3.相关概念(1)细胞贴壁:悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上。(2)接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖的现象。(3)原代培养:指动物组织消化后的初次培养。(4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现接触抑制后,需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖的培养过程。4.培养条件(1)无菌、无毒的环境:培养液中添加一定量的抗生素,并定期更换培养液,以清除代谢产物,防止对细胞自身造成危害。(2)营养(3)温度和pH(4)气体环境5.应用(1)生产生物制品:如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。(2)应用于基因工程:动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞。(3)应用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性。(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,如筛选抗癌药物等。三、动物体细胞核移植技术和克隆动物(阅读P47-50)1.概念将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,最终发育为动物个体。2.分类包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植,其中胚胎细胞核移植较易成功。3.过程4.应用前景(1)加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育。(2)保护濒危物种。(3)转基因克隆动物可作为生物反应器,生产许多医用蛋白。(4)转基因克隆动物细胞、组织和器官可作为异种移植的供体。(5)人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化,形成相应的组织、器官后,可以用于组织器官的移植。(6)研究胚胎发育及衰老过程,追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。5.存在问题(1)成功率非常低(低/高)。(2)绝大多数克隆动物还存在健康问题。(3)克隆动物食品的安全性存在争议。判断正误:(1)动物细胞培养时,需要对细胞进行一次脱分化处理和两次胰蛋白酶处理。( )(2)恒温条件下进行动物细胞培养,细胞周期持续时间长短不随细胞培养进程而改变。( )(3)动物细胞培养技术可用于检测有毒物质、构建人造皮肤、大量生产药物蛋白。( )(4)为了防止培养过程中发生微生物污染,应将培养箱抽成真空以消毒、灭菌。( )(5)动物细胞核移植的原理是动物细胞核的全能性。( )(6)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。( )(7)动物细胞在培养的过程中一些细胞会发生遗传物质的变化。( )(8)目前使用的或冷冻保存的细胞通常是10代以内的细胞,以保持正常的二倍体核型。( )(9)在动物细胞的培养过程中,培养液中可以不加入血清和血浆等物质。( )答案 (1)× (2)× (3)√ (4)× (5)√ (6)√ (7)√ (8)√ (9)×一、动物细胞培养1.动物细胞培养过程分析(1)过程:(2)贴壁生长现象及接触抑制现象①贴壁生长:动物细胞在液体培养基中悬浮生长一段时间之后,大部分细胞会贴附在培养瓶壁上生长。②接触抑制:细胞进行有丝分裂,数目增加到表面相互接触时,停止分裂增殖,出现接触抑制现象。(3)原代培养和传代培养①原代培养:动物组织消化后的初次培养。②传代培养:原代培养过程中,贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶培养,让细胞继续增殖。2.动物细胞培养与植物组织培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养生物学原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体液体培养基成分蔗糖、氨基酸、水、矿物质、生长素、细胞分裂素、琼脂等葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、水、血清、血浆等培养结果新的植株或组织大量新细胞或细胞产物应用①快速繁殖②培育无病毒植株③细胞产物的工厂化生产④制作人工种子①生产病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等②检测有毒物质③生理、病理、药理研究培养条件无菌、适宜的温度和pH取材植物器官、组织或细胞动物早期胚胎、幼龄动物的器官或组织培养对象植物器官、组织或细胞分散的单个细胞过程脱分化、再分化原代培养、传代培养细胞分裂、生长、分化特点①分裂:形成愈伤组织;②分化:形成根、芽①只分裂不分化;②贴壁生长;③接触抑制1.动物细胞培养为什么需要无菌、无毒的环境?答案 细菌、真菌和病毒等均可造成细胞培养环境的污染,而离体培养的细胞已失去了对微生物和有毒物质的防御
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