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根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法_____________________ _________________________________________________________________________。 解析:灭活的仙台病毒和聚乙二醇均可诱导动物细胞融合。杂交瘤细胞同时具有两个亲代细胞的遗传特性。可以在体外也可以在体内培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 答案:(1)吞噬(或巨噬) (2)灭活的仙台病毒或聚乙二醇 既能产生特异性抗体,又能无限增殖 (3)特异性强,纯度高(或:专一性强、灵敏度高) 体外培养法和动物体内培养法 变式训练 (2012·西宁五中高二检测)根据单克隆抗体制备流程示意图判断以下选项中正确的是( ) A.单克隆抗体技术的原理包括细胞增殖、细胞膜的流动性、细胞的全能性等 B.根据培养基的物理性质分类,图中HAT培养基属于选择培养基 C.在制备单克隆抗体的过程中有两次选择,第一次是选择杂交瘤细胞,第二次是选择能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞 D.老鼠骨髓瘤细胞染色体数是40,效应B细胞的染色体数为46,融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为86 解析:选C。单克隆抗体的制备过程中,杂交瘤细胞不能培育成个体,未体现细胞的全能性,A错;培养基根据物理性质可分为固体培养基和液体培养基等,按用途分为选择培养基、鉴别培养基等,B错;融合后杂交瘤细胞染色体数是86,DNA数要考虑细胞质中的DNA,多于86,D错;C项描述正确。 要点三 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体制备) 融合前处理 纤维素酶、果胶酶除去细胞壁 注射特定抗原免疫处理正常小鼠 促融 ①物理法:离心、振动、电激 ②化学法:聚乙二醇 ①物理法:离心、振动、电激 ②化学法:聚乙二醇 ③生物法:灭活的病毒 理论基础 细胞的全能性、细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、细胞增殖 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体制备) 过程 原生质体的制备 原生质体的融合 杂种细胞的筛选与培养 杂种植株诱导与鉴定 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体制备) 意义和用途 ①克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展杂交的亲本组合范围 ②应用:如白菜—甘蓝杂种植株 ①制备单克隆抗体 ②诊断、治疗、预防疾病。例如:a.肿瘤定位诊断,放射性抗体―→肿瘤 b.生物导弹治疗,抗体—抗癌药物―→肿瘤 有性生殖的生物产生后代需进行受精作用,植物体细胞杂交要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题: 例3 (1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用,在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,较为简便的筛选方法是_____________________________________ _____________________________________。 (2)若a、b表示两种植物体细胞,则由d细胞形成杂种植株的原理是_____________________ _____________________________________________________________________________。 这种育种方法的优点是________________________________________________________________________。 (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,则d细胞的特点是__________________________ ______________________________________。 由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有__________________________的特点。一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是___________________ ______________________________________。 【解析】 (1)a是基因型为Hhrr的烟草的花粉,故其基因型为Hr、hr;b是基因型为hhRr的烟草的花粉,故其基因型为hR、hr,因此经细胞融合可能形成的融合细胞有:HHrr、hhrr、hhRR、Hhrr、hhRr、HhRr,共6种,分析这6种细胞除HhRr之外均有一对隐性纯合基因(rr或hh),即在光照强度大于800 lx时都不能生长,因此获取基因型为HhRr的杂
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