unit_13.一、生物课本内的实验复习课件.pptVIP

unit_13.一、生物课本内的实验 （一）学习任务 1、怎样正确使用显微镜？ 2、怎样制作临时装片? 3、鉴定还原糖的原理、步骤、颜色变化各是什么？ 4、鉴定蛋白质的原理、步骤、颜色变化各是什么？ 5、鉴定脂肪的原理、步骤各是什么？ 6、提取叶绿体色素研磨时加入丙酮、二氧化硅、碳酸钙的目的是什么？ 7、分离叶绿体色素的方法、原理、结果各是什么？ 8、DNA提取的原理、过程和鉴定用的试剂各是什么？ 9、怎样进行种群密度的抽样调查？ 2、临时装片的制作和染色 * * 1、显微镜的使用 ①物象放大倍数=目镜 X 物镜 ②目镜头倍数越高越短；物镜头倍数越高越长。 ③放大倍数越高视野越暗。 ④观察时必须先用低倍镜后用高倍镜 ⑤观察细胞质等颜色浅的材料时视野暗一些。 ⑥要使物像向下移动，应向上推动波片。 ⑦放大倍数指的是材料的长度或宽度。 ⑧光线弱时一般选用大光圈、凹面镜。 （二）主要内容的讲解 ①、临时装片的制作： 准备载片、盖片 在载片中央滴一滴清水 材料处理 盖盖波片 ②、临时装片的染色： ①制片过程中染色 ②制片后染色：引流法。 （1）原理： Cu(OH)2 +还原糖 Cu2O + 糖酸 （2）步骤： ①生物组织提取液： ②配制斐林试剂 ③组织液与斐林试剂混合 ④水浴加热并观察颜色变化 所用组织颜色越浅越好 （3）颜色变化： 浅蓝 棕色 砖红色沉淀 （4）注意事项： ①班氏糖定性试剂和斐林试剂原理相同，原料不同。 ②斐林试剂即配即用 ③加热时试管底不要触及烧杯底部。 0.1g/ml NaOH 0.05g/ml CuSO4 混合 3、鉴定还原糖的原理、步骤、颜色变化各是什么？ 砖红色 （1）原理： 在碱性环境中蛋白质的肽键与Cu2+ 作用，形成紫色络合物。 （2）步骤： ①提取组织液 ②向试管中加入2ml组织提取液 ③加入2ml双缩尿试剂A(0.1g/ml NaOH）摇荡均匀 ④加入双缩尿试剂B(0.01g/ml CuSO4）摇荡均匀。观察颜色变化。 （3）颜色变化： 无色 浅蓝色 紫色 （4）注意事项： ①先加NaOH后加CuSO4 ② CuSO4不能过量 4、鉴定蛋白质的原理、步骤、颜色变化各是什么？ ①原理： 脂肪 + 苏丹III 苏丹IV 橘黄色 红色 ②步骤： 切片 选材 染色 洗去浮色 制装片 镜检 5、鉴定脂肪的原理、步骤各是什么？ ①丙酮：用于提取叶绿体色素。 ②研磨时加入CaCO3的目的是为了中和液泡中的酸性物质保护叶绿素。 ③加少量二氧化硅是为了研磨充分。 ①方法: ②原理: ③结果：从上到下依次是： 胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b 纸层析法 不同色素在层析液中的溶解度不同，扩散速度不同。 6、提取叶绿体色素研磨时加入丙酮、二氧化硅、碳酸钙的目的是什么？ 7、分离叶绿体色素的方法、原理、结果各是什么？ （1）原理： ①DNA微溶于水，为白色纤维状固体 ②DNA在2mol/L的氯化钠溶液中溶解度最高。 ③DNA不溶于有机溶剂。95%的冷酒精能沉淀DNA 在0.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低。 ④DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色 8、DNA提取的原理、过程和鉴定用的试剂各是什么？ 5-10ml鸡血细胞放入50ml烧杯中 细胞核物质（滤液中） 加20ml蒸馏水同向快速搅拌5分钟，两层纱布过滤滤去细胞碎片 溶解DNA 40ml 2mol氯化钠同向搅拌1分钟，使蛋白质与DNA分离 DNA粘稠物（纱布上） 加水稀释氯化钠至0.14mol，同向搅拌，多层纱布滤去溶在氯化钠中的杂质。 含有DNA的氯化钠溶液（滤液中） 含杂质较少的DNA（玻璃棒上的丝状物） 加2mol氯化钠20ml同向搅拌3分钟，多层纱布过滤除去不溶于氯化钠的杂质。 加95%冷酒精同向搅拌，除去溶在酒精中的杂质。 （2）提取过程 两次加蒸馏水 使血细胞张破 稀释氯化钠使DAN析出 两次加氯化钠 溶解核DAN并在加水后使DNA析出， 除去溶在氯化钠中的杂质 溶解DNA除去不溶在氯化钠中的杂质。 1次加冷酒精： 使DNA析出，除去溶在酒精中的杂质。 三次过滤 两 层沙布滤去细胞碎片。（弃上留下） 多层纱布滤去溶含杂质的氯化钠（弃下留上） 多层沙布滤去不溶在氯化钠中的杂质。 （弃上留下）