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易错易 误辨析 菜 单 隐 藏 山东金太阳书业有限公司 2013 · 新课标高考总复习 · 配浙科生物 [含一、二、三、四章] Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一、限制性核酸内切酶和DNA连接酶作用解析 1．限制酶 限制酶具有专一性，表现在两个方面 (1)识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列。 (2)切割特定序列中的特定位点。使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。产生的DNA片段末端通常有两种形式——粘性末端和平末端。 ①粘性末端：当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是粘性末端。 如：EcoR Ⅰ识别GAATTC序列，将G与A两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。如下图所示： Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. ②平末端：当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的则是平末端。 如：Sma Ⅰ识别CCCGGG序列，将C与G两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。如下图所示： [特别提醒]　一种限制酶只能专一识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割后只能产生一种末端。由一种限制酶切出的末端相同，并能被特定的DNA连接酶连接起来。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2．DNA连接酶 (1)DNA连接酶的分类 根据酶的来源不同，可以将这些酶分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E·coli DNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4 DNA连接酶。 (2)DNA连接酶的作用 DNA连接酶的作用是将限制酶切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子。两类DNA连接酶都是将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。如图所示： (3)两类酶在性质上的差别 E·coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的粘性末端之间连接起来，不能将双链DNA片段平末端之间进行连接。而T4 DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的粘性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率比较低。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 3．几种易混淆酶的比较 名称 限制酶 DNA 连接酶 DNA 聚合酶 RNA 聚合酶 逆转录酶 DNA 解旋酶 DNA 水解酶 功　能 特异性地切断DNA链中的磷酸二酯键 连接DNA片段之间的磷酸二酯键，不需要模板 连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，需要一条DNA链作模板 连接RNA片段与单个核糖核苷酸之间的磷酸二酯键，也需要模板 作用于磷酸二酯键 使碱基对之间的氢键断裂 使DNA分子所有磷酸二酯键断裂 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、基因、基因文库和目的基因的概念比较 1．基因：具有遗传效应的DNA片段，是控制生物性状的遗传物质的结构和功能单位，基因的脱氧核苷酸序列代表遗传信息。 2．基因文库 (1)含义：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中通过克隆而储存，含有这种生物的不同基因的受体菌群体便构成了基因文库。 (2)分类 ①基因组文库：含有一种生物的所有基因的基因文库。 ②部分基因文库：含有一种生物的部分基因的基因文库，如cDNA文库。 (3)建立基因文库的目的：为保存或获得大量的目的基因作准备。 3．目的基因：基因工程操作中需要的外源基因，它是编码某种蛋白质的结构基因，如生物的抗逆性基因、抗虫基因等。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-